特异切割多药耐药基因（MDR）1的核酶设计与克隆

• 作 者: 刘顺英 孙宁 武景阳 单祥年
• 机 构: 南京铁道医学院附属医院消化科,南京铁道医学院附属医院生物学教研室
• 出 处: 南京铁道医学院学报
• 发表日期: 1999年4期
• 关键词: 多药耐药基因 核酶 分子克隆 肿瘤 MDR1 Gene ribozyme cloning molecular

目的：设计与克隆特异切割多药耐药基因的核酶。方法：针对人类ＭＤＲ１ ｍＲＮＡ第Ⅶ外显子附近第１９６密码子的ＧＵＣ序列，按照“锤头结构”模型，设计，合成核酶，并定向克隆入载体ＰＧＥＭ－２Ｚｆ（ｔ）中，通过ＰＣＲ－ＳＳＣＰ法及限制性分析，确保扩增片断为外源插入的ＤＮＡ序列，并经ＤＮＡ测序证实。结果：重组质粒插入片断序列与设计序列一致。结论：设计、克隆核酶作用人类ＭＤＲ １ｍＲＮＡ是有效的。