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α－半乳糖苷酶是实现Ｂ→Ｏ血型转变、制备通用型血的关键工具酶。本文报道利用反转录ＰＣＲ方法从中国少贯兴隆咖啡豆中克隆α－半乳糖苷酶ＣＤＮＡ，插入嗜甲基酵母ｐｉｃｈａ ｐａｓｔｏｒｉｓ表达载体ＰＰＩＣ９Ｋ中，转化、Ｐ．ｐａｓｔｏｒｉｓ ＧＳ１１５，筛选高达重组茵株。经甲醇诱导表达７天后，发酵液总蛋白分泌量约１．２ｍｇ／ｍＬ，ＳＤＳ－ＰＡＧＥ呈现约４１ＫＤ特异表达带，与专一性底物对－硝基－苯基α－Ｄ－