转译起始密码子周边序列的改变对Δ~6-脂肪酸脱氢酶基因表达的影响

• 作 者: 张琦 李明春 孙颖 马海庭 邢来君 孙红妍 任勇
• 机 构: 南开大学微生物学系,南开大学微生物学系
• 出 处: 微生物学报
• 发表日期: 2004年04期
• 关键词: 少根根霉 Δ6-脂肪酸脱氢酶基因 转译起始密码子 酿酒酵母 γ-亚麻酸 表达
• 基金项目: 国家自然科学基金 ( 3 0 2 0 0 176) ;教育部高等学校骨干教师资助计划项目~~

将少根根霉中Δ6_脂肪酸脱氢酶基因 （RAD6 ）的起始密码子周边序列作适当的修改 ,并把修改后获得的片段（RAD6₁ ）亚克隆到表达载体pYES2 0 ,构建重组表达载体pYRAD6₁。经测序验证 ,把pYRAD6₁转化到酿酒酵母的缺陷型菌株INVScl进行表达分析 ,同时以空载体pYES2 0和出发序列所构建的pYRAD6作为对照。通过气相色谱 （GC）和气相色谱 质谱 （GC_MS）分析表明 ,在pYRAD6和pYRAD6₁转化的酿酒酵母中生成γ_亚麻酸 ,而pYES2 0中没有检测到。其中 ,pYRAD6₁转化的酿酒酵母γ_亚麻酸表达量占细胞总脂肪酸含量的 5 2 3% ,而对照pYRAD6转化的酿酒酵母中表达量只占 2 6 4 %。