【摘 要】
：
目的: 重组表达angiostatin的功能结构域K1-3,并制备抗体,为其作用机理研究打下基础. 方法: 设计引物,通过PCR以人纤溶酶原cDNA为模板扩增出K1-3基因片段,克隆至pGEX-4T-1融
【机 构】
：
第四军医大学基础部生物化学与分子生物学教研室,第四军医大学科研处生物技术中心,西京医院消化内科研究所
论文部分内容阅读
目的: 重组表达angiostatin的功能结构域K1-3,并制备抗体,为其作用机理研究打下基础. 方法: 设计引物,通过PCR以人纤溶酶原cDNA为模板扩增出K1-3基因片段,克隆至pGEX-4T-1融合表达载体,IPTG诱导,挑出表达克隆,切下基因片段,克隆至pUC19进行序列测定,保留序列完全正确的克隆并进行诱导表达;从SDS-PAGE上切下表达的蛋白条带作为抗原免疫家兔,制备多克隆抗体, 并以Western blotting检测抗血清的结合特异性. 结果: DNA电泳结果显示PCR扩增出约780 bp的片段,序列测定表明为K1-3; K1-3可以与GST融合表达,产物存在于包含体中;抗血清与K1-3及煮沸变性的天然angiostatin特异地结合. 结论: 经PCR扩增并克隆到序列正确的K1-3片段,而且能够以融合形式表达,用其免疫家兔获得特异性抗体.
其他文献
从所处的特殊地理位置和保护南水北调中线工程水源区优良水质的特殊历史使命出发,丹江口市提出了“构建生态、绿色、健康丹江口”的战略举措,科学谋划、集中社会力量,开展了
湖北省丹江口库区及上游水土保持一期工程包含7个县(市、区)的46个项目区、234条小流域.截至目前,工程已累计完成投资10.4亿元,完成水土流失治理面积4 638 km2,全面完成了治
分析了近20年来玉林市稻飞虱发生特点及其灾变规律,剖析了近年来其发生为害偏重原因。认为近年来稻飞虱发生面积和范围扩大,暴发频率增加,为害加重,主要受稻飞虱抗药性、迁入
木霉菌作为一种重要的植物病害生防菌被广泛用于作物病害生物防治。为了检测木霉菌对家蚕的安全性从而获得能够安全用于植物病害防治的生防木霉菌制剂,用对病害具有较好防治
调查发现,烟粉虱在扬州市发生呈现峰次多、虫量高,适生场所和生物型复杂,造成损失大等特点。经分析认为,设施蔬菜面积不断扩大、寄主种类多、气象条件有利、防治难度大、为害
黄芪白粉病的发生与温度关系密切。在6月下旬日均温度18℃时开始发生,当7月下旬至8月日均温约20℃时快速扩散,到9月中旬日均温度低于16℃时逐渐减缓。降雨也会加剧病害发展。
结合田间自然感虫或人工控制虫量,测定在南美斑潜蝇不同虫情指数下的棚室芹菜和油菜的产量,得出受害棚室蔬菜的产量损失规律。结果表明,随着南美斑潜蝇虫情指数的增大,芹菜单
为筛选出可有效防治五味子褐斑病的药剂,在实验室条件下,采用菌丝生长速率法测定了14种杀菌剂对五味子褐斑病菌的毒力作用。结果表明,供试药剂中64%噁霜灵.锰锌WP和400 g/L氟
用60%吡虫啉FS单剂及混合40%萎锈.福美双SC进行花生拌种,调查各处理对花生常见病虫害的防控效果以及对花生安全性和产量的影响。结果表明,药剂拌种对花生的生长无不良影响,对
目的：建立一个在大鼠心肌细胞表达人白细胞介素１０（ＨｕｍａｎＩｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ１０，ｈＩＬ１０）的重组逆转录病毒载体基因转移系统，为下一步的研究工作做准备。方法：将构建的表达人白细胞介素１０的逆转录病毒重组体ｐＬＸ（ｈＩＬ１０）ＳＮ经ＰＡ３１７细胞包装