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耐碱芽孢杆菌ＮＴＴ３６总ＤＮＡ经ＥｃｏＲ１酶不完全消化，与质粒ｐＵＣ１８的ＥｃｏＲＲＩ酶切产物在体外重组后，转化大肠杆菌ＨＢ１０１，在碱性平板上直接筛选耐碱转化子，转化经检测具有氨苄青霉素抗体，分析表明转化子具有１５ｋｂ大小的重组质粒，用此重组质粒转化大肠杆菌ＨＢ１０１，ＤＨ５ａ和ＸＬ１－Ｂｌｕｅ，均产生大量同时具有耐碱性和Ａｍｐ抗性的转化子，通过Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交和点杂交证明此重组质粒（定名为