【摘 要】
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目的 探讨光动力治疗协同shRNA-CDC28激酶调节亚单位1B(CKS1B)治疗基因递送纳米胶束靶向CKS1B逆转肺癌耐药.方法 通过共价键构建超支化聚甘油醚(HPG)-第二代光敏剂二氢卟吩(C
【机 构】
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广州医科大学附属第二医院,广东广州510250;广州医科大学药学院,广东广州511436
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目的 探讨光动力治疗协同shRNA-CDC28激酶调节亚单位1B(CKS1B)治疗基因递送纳米胶束靶向CKS1B逆转肺癌耐药.方法 通过共价键构建超支化聚甘油醚(HPG)-第二代光敏剂二氢卟吩(Ce6)-支化聚乙烯亚胺(bPEI)共聚物(HPG-Ce6-bPEI,HCP)作为基因递送载体.马尔文粒径仪测试HCP/pshRNA-CKS1B纳米胶束粒径和电位.扫描电镜检测纳米胶束形状和分散度.Q-PCR检测纳米胶束抑制细胞后CKS1B mRNA表达.荧光显微镜检测纳米胶束转染肺癌耐药细胞的效果.MTT测试纳米胶束抑制高表达CKS1B的H358细胞(H358 CKS1B-OE)的效果.结果 HCP构建成功并通过核磁共振氢谱(HNMR)表征.当N/P(HCP所含N和质粒所含P的摩尔比)=21时,HCP/pshRNA-CKS1B纳米胶束粒径和电荷分别为130 nm和12.5 mV,且CKS1B mRNA表达最低.扫描电镜发现HCP/pshRNA-CKS1B纳米胶束呈圆形,分散情况较好,大小与HCP纳米胶束相近.细胞摄取实验显示光照下HCP/pshRNA-CKS1B纳米胶束转染耐药肺癌细胞荧光强度显著高于HCP/pshRNA-CKS1B纳米胶束、PEI-25× 103 Mr/pshRNA-CKS 1B、游离香豆素和对照组.MTT实验显示光照下HCP/pshRNA-CKS 1B纳米胶束抑制耐药细胞生存率的强度显著高于其他组.结论 光照下HCP/pshRNA-CKS1B纳米胶束能有效逆转肺癌耐药.
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