生精相关基因mTSARG3的原核表达和抗体制备

来源 :南方医科大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:herozds2009
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目的构建小鼠生精相关基因pGEX-KG/mTSARG3重组载体,进行原核表达和多克隆抗体制备。方法应用RT-PCR从小鼠睾丸cDNA文库中扩增mTSARG3的开放阅读框,T-A克隆后将mTSARG3插入到原核表达载体pGEX-KG中,经测序鉴定后将重组质粒转入宿主菌E.coli BL21,IPTG诱导表达GST/mTSARG3融合蛋白,采用SDS-PAGE和Western blotting对融合蛋白进行分析和鉴定。以融合蛋白为免疫原免疫家兔,制备抗mTSARG3多克隆抗体并进行Western blotti
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