【摘 要】
:
目的:建立人类细小病毒B19实时荧光定量PCR(Q-PCR)检测方法,并对该方法进行方法学验证。方法:针对B19病毒三种基因型的高度保守区设计特异性引物和探针,建立B19 Q-PCR标准曲线。并分别从检测限和定量限、型别覆盖能力、特异性、定量范围及定量线性、精密度、回收率、不同机型、以及不同混样模式进行方法学验证。结果:当B19病毒定量参考品范围为2.0×10~1~1.0×10~8 IU·mL-1
【机 构】
:
中国医学科学院北京协和医学院输血研究所
【基金项目】
:
国家药典委员会药品标准制修订研究课题的资助项目(2019S01,2020S04);
论文部分内容阅读
目的:建立人类细小病毒B19实时荧光定量PCR(Q-PCR)检测方法,并对该方法进行方法学验证。方法:针对B19病毒三种基因型的高度保守区设计特异性引物和探针,建立B19 Q-PCR标准曲线。并分别从检测限和定量限、型别覆盖能力、特异性、定量范围及定量线性、精密度、回收率、不同机型、以及不同混样模式进行方法学验证。结果:当B19病毒定量参考品范围为2.0×10~1~1.0×10~8 IU·mL-1时,R~2>0.99,扩增效率>97.2%,线性范围相关性良好。定量下限为20 IU·mL-1,检测下限为10 IU·mL-1,针对B19病毒3种基因型样本均能检出,具有相同的定量下限和检测下限。特异性结果显示,本方法检测甲型肝炎病毒、乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒、人类免疫缺陷病毒1型、人巨细胞病毒、戊型肝炎病毒、单纯疱疹病毒1型、梅毒螺旋体等核酸阳性血浆,均无非特异反应,且在上述病原体存在的情况下,B19病毒的定量下限和检测下限均能稳定检出,不受干扰。回收率结果显示,本方法回收率在50%-150%之间,RSD<30%。此外,本方法的精密性变异系数均小于3%,在ABI 7500和伯乐CFX-96机型上,相关技术指标均能达标。且采用48混合96混检测模式检测终浓度10~4 IU·mL-1和20 IU·mL-1的样本,定量要求符合标准。结论:本方法线性范围广、灵敏度高、特异性和精密度好,回收率高,且可用于不同品牌的荧光定量PCR仪,适用范围广,检测模式灵活,可用于人血浆B19病毒核酸筛查,本研究将为血液制品质量标准提高提供技术储备。
其他文献
断:加近大些投年入,,我事国业对单事位业资单产位规建模设不越断来扩越大,重资视,产不类型越来越丰富,如何管好用好每一笔财政资金已成为社会关注的焦点。事业单位管理会计与财务会计二者融合有利于单位财务的监督,能促进国有资产的增值与保值;二者融合是事业单位会计工作发展的主流趋势。因此,本文将针对二者融合的问题展开探讨,从二者区别和联系入手,深入分析二者融合动因,并结合自身工作经历和实践经验,对事业单位财
政务服务窗口作为服务人民群众的最前沿阵地,研究其标准化建设对推进国家治理体系和治理能力现代化具有重要意义。长三角是我国经济较为发达的地区,通过对其中10个城市的政策文本进行梳理,以PDCA循环理论所倡导的新理念、新思路与新方法作为借鉴和指导,按照“计划—执行—监控—改进”四个方面,为政府部门具体实施政务服务质量管理工作提供借鉴,将其进行规范化运作、标准化考核和持续化改进的功能运用到政务服务质量检查
作为人们日常生活不可或缺的重要功能材料,铅基压电陶瓷有一个无法回避的问题---含质量分数超过60%的铅元素,而铅对人体和环境有很大的毒害作用。随着时代的进步和人民生活水平的日益提升,压电陶瓷的无铅化迫在眉睫。近年来,作为无铅压电陶瓷的代表---铌酸钾钠基(KNN)陶瓷材料的性能不断突破,被认为是最有希望取代铅基压电陶瓷的材料之一。然而目前的研究报道显示KNN基陶瓷的工艺敏感性很强,制备工艺重复性和
功率器件是宇航电源的重要组成部分,在整个航天技术快速发展的背景下,现有的宇航电源已无法满足小型化、轻量化、高效率和超大功率化的任务要求。以碳化硅(Silicon Carbide,SiC)为代表的宽禁带功率器件可以将宇航电源的工作频率推向至兆赫兹以上,由此将带来宇航电源技术的突破。综合文献及作者实践,回顾了SiC功率器件的发展,介绍了SiC材料的物理特性,分析了SiC功率器件的优势和研究现状。提出S
钙钛矿太阳能电池已然成为光伏研究领域的焦点,现今单结钙钛矿光伏器件世界最高认证功率转换效率为25.7%。由于短路电流密度与填充因子已接近理论计算极限,开路电压成为提升钙钛矿光伏器件效率的关键。表面缺陷钝化通过分子键合在优化钙钛矿太阳能电池性能,特别是开路电压方面起到重要作用。然而,目前基于钙钛矿表面钝化的研究聚焦于微观机制和器件性能方面。从宏观角度分析,表面缺陷与钝化剂分子的键合过程及缺陷覆盖率的
反溶剂法是制备二维Ruddlesden-Popper(RP)相钙钛矿薄膜的主要方法之一[1,2]。为了研究反溶剂对基于RP相钙钛矿薄膜的太阳能电池性能的影响,我们分别采用甲苯(TL)、乙酸乙酯(EA)和氯苯(CB)三种溶剂制备了GA2MA4Pb5I16的2D RP相钙钛矿,并探索了不同溶剂对钙钛矿薄膜结晶性、光学性能及其相对应太阳能电池光伏性能的影响。研究结果表明,与TL和EA形成的钙钛矿薄膜相比
<正>随着人们生活节奏的日益加快,越来越多的人受到了脱发的影响。脱发会对人们的自信和自尊产生消极作用,从而影响心理健康甚至生活状态[1]。各种病理性脱发中,雄激素性脱发(androgenetic alopecia, AGA)为较普遍的一种病理脱发类型。在男性中,其发生最早时期开始在青春期前或青春期后,主要脱发病理改变表现之一是长期进行性的脱发部位毛囊组织微小化,疾病的发生常受遗传因素与雄激素的影响
铁路企业标准化建设为保障铁路运营安全、促进铁路科技创新和产业升级发挥着重要的支撑作用。以中国铁路兰州局集团有限公司企业标准化建设工作为依据展开研究:首先建立标准化建设的指标体系;然后在全面质量管理循环理论(PDCA理论)基础上,对标准化建设工作的内容与成效进行分析,标准化建设内容包括计划制定、工作实施、效果检查和问题处理等几个方面;最后在强化体系管理、建立健全工作机制、抓实评价改进以及强化调查研究
在新的经济发展形势下,财务管理工作也要进一步明确发展新理念和新要求,不仅要加大财务工作的关注力度,也要明确当前管理会计工作中所存在的现实问题,要推动财务会计与管理会计的融合发展。对于财务管理者来说,要为财务工作提供良好的平台,也要做好财会队伍建设工作,提升财务会计与管理会计的协同效应。
压接型绝缘栅双极晶体管(press pack insulated gate bipolar transistor,PP-IGBT)器件具有功率密度高、短路失效等优势,已被广泛应用于柔性直流输电换流阀中。现有压接型IGBT器件短路失效研究主要基于宏观测试结果,难以揭示由微观材料失效诱发器件短路失效的机理,本文基于圧接型IGBT器件短路测试结果,提出压接型IGBT器件短路失效机理的多层级模拟方法。首先