内毒素耐受小鼠脾脏CD11clowCD45RBhigh树突状细胞对急性肝功能衰竭锌指蛋白A20表达的影响

• 作 者: 董进中 王丽萍 张赛男 施春玮 杨乃彬 倪顺兰 卢明芹
• 机 构: 315000 宁波市第一医院重症监护病房,315000 宁波市第一医院感染科,温州医科大学附属第一医院感染科,杭州市萧山区第一人民医院感染科,温州医科大学附属第一医院感染科,温州医科大学附属第一医院感
• 出 处: 中华传染病杂志
• 发表日期: 2015年33期
• 关键词: 肝功能衰竭 急性 脂多糖类 树突细胞 NF-κB 锌指蛋白 A20

目的

观察内毒素耐受CD11c^lowCD45RB^highDC对急性肝功能衰竭小鼠锌指蛋白A20表达的影响，探讨其在急性肝功能衰竭治疗中的作用及可能机制。

方法

建立内毒素耐受小鼠模型，经免疫磁珠法分选正常小鼠脾脏来源CD11c^lowCD45RB^high DC和内毒素耐受小鼠脾脏来源CD11c^lowCD45RB^high DC。选取健康雄性BALB/c小鼠126只，随机分为正常对照组(A组6只)、急性肝功能衰竭组(B组40只)、正常小鼠脾脏CD11c^lowCD45RB^high DC治疗组(C组40只)和内毒素耐受小鼠脾脏CD11c^lowCD45RB^high DC治疗组(D组40只)；B、C、D三组小鼠同时腹腔注射D-GalN 600 mg/kg和脂多糖10 μg/只，A组注射等体积0.9%氯化钠溶液；30 min后C组腹腔注射正常小鼠脾脏来源CD11c^lowCD45RB^high DC(1×10⁶/只，0.2 mL/只)，D组腹腔注射内毒素耐受小鼠脾脏来源CD11c^lowCD45RB^high DC(1×10⁶/只，0.2 mL/只)进行干预，A、B组则给予相同剂量的0.9%氯化钠溶液。检测各组小鼠各时间点血ALT、AST水平；采用HE染色观察各组小鼠各时间点肝组织病理变化；反转录(RT)-PCR和Western免疫印迹法检测各组小鼠各时间点TNF-α、核因子-κB、锌指蛋白A20表达情况。样本均数比较采用单因素方差分析。进行正态性检验和方差齐性分析，方差齐者采用LSD检验。

结果

B组在造模2 h后ALT、AST开始逐渐升高，于24 h达高峰，明显高于A组(t值分别为31.00和11.52，均P<0.05)。C、D两组于造模2 h后ALT、AST也逐渐升高，于24 h达高峰，与B组比较，差异均有统计学意义(t值分别为14.60和26.43，均P<0.05)。B组小鼠TNF-α mRNA(t＝427.58)、核因子-κB mRNA(t＝122.42)及蛋白表达量(t值分别为179.35和165.98)随着时间的推移逐渐升高，至12 h达高峰，与A组相比差异有统计学意义(均P<0.05)。 B组小鼠锌指蛋白A20 mRNA及蛋白则随着时间的延长逐渐降低，在12 h达到最低，与A组相比差异有统计学意义(t值分别为90.80和160.43，均P<0.05)；A20 mRNA及蛋白表达量则随着时间的延长逐渐增加，在12 h达到最高值，且D组增加较C组更明显，差异有统计学意义(t值分别为11.21和24.80，均P<0.05)。

结论

内毒素耐受小鼠脾脏来源CD11c^lowCD45RB^high DC治疗可减轻肝脏损害。