应用抑制性消减杂交技术筛选HBeAg蛋白结合蛋白E36的上调基因

• 作 者: 武会娟 成军 张丽娟 蓝贤勇 伦永志 郭江 毛羽 罗军
• 机 构: 北京地坛医院传染病研究所,西北农林科技大学动物科技学院
• 出 处: 医学分子生物学杂志
• 发表日期: 2006年5期
• 关键词: E36基因 HepG2细胞 抑制性消减杂交技术 反式调节 E36 gene HepG2 cells suppression subtractive hybr
• 基金项目: 国家自然科学基金（No.C03011402,No.C30070689）,军队十五科技攻关项目（No.01MB135）

目的应用酵母双杂交及生物信息学（bioinformatics）技术获得HBeAg蛋白结合蛋白HBEBP36（E36），为了解该基因的反式调节机制，利用抑制性消减杂交技术筛选并克隆E36蛋白反式激活的靶基因。方法E36基因表达质粒pcDNA3、1／myc-his（A）（-）-E36转染HepG2细胞，以空载体pcDNA3．1／myc-his（A）（一）为平行对照，制备转染后的细胞裂解液，提取mRNA并逆转录为cDNA，经RsaI酶切后，将实验组cDNA分成两组，分别与两种不同的接头衔接，再与对照组cDNA进