丙型肝炎病毒5＇端非编码区结构域Ⅰ、Ⅱ在其翻译启动活性中的作用具有细胞特异性

• 作 者: 黄小晔 刘丽莎 崔光晶 刘西霞 刘美佟 马琼山 刘水平
• 机 构: 中南大学湘雅医学院医学微生物学系
• 出 处: 南方医科大学学报
• 发表日期: 2014年12期
• 关键词: 丙型肝炎病毒 5'端非编码区 翻译启动活性 细胞特异性 hepatitis C virus 5＇ untranslated region transla
• 基金项目: 湖南省科技计划项目（2014SK3248）,中南大学中央高校基本科研业务费专项资金

目的：分析在不同宿主细胞的翻译体系下，缺失不同片段的HCV 5＇UTR翻译启动活性的差异。方法以脂质体介导基因转染技术，将截短型HCV 5＇UTR调控Fluc的真核表达质粒与Rluc真核表达质粒pRL-TK共转染至不同的细胞中，转染后36 h：①提取细胞RNA，半定量RT-PCR检测目的质粒的转录水平；②用双荧光素酶报告基因检测系统检测Fluc基因相对表达活性，分析HCV 5＇UTR缺失不同结构域后在不同翻译体系中翻译启动活性的差异。结果⑴缺失5＇端44个碱基的HCV 5＇UTR的翻译启动活性分别与缺失前