【摘 要】
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目的 对细粒棘球蚴重组蛋白P29(rEg.P29)诱导小鼠差异表达的microRNA进行筛选和分析,以期为rEg.P29免疫前后宿主免疫细胞的分化研究提供线索.方法 将6-8周龄SPF级BALB/c小鼠随机分为2组,rEg.P29免疫组和对照组,每组12只.rEg.P29免疫组于小鼠腹部多点免疫重组蛋白100 μl(含rEg.P29 10μg),共免疫2次,第1次免疫2周后进行第2次免疫.提取第2周(第1次免疫后2周)、第6周(第1次免疫后4周)、第8周(第1次免疫后6周)各组小鼠外周血淋巴细胞,分离mi
【机 构】
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宁夏医科大学科技中心,宁夏银川750004;宁夏常见传染病防治重点实验室;宁夏医科大学基础医学院;宁夏常见传染病防治重点实验室;宁夏医科大学临床医学院;宁夏常见传染病防治重点实验室;宁夏医科大学基础医
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目的 对细粒棘球蚴重组蛋白P29(rEg.P29)诱导小鼠差异表达的microRNA进行筛选和分析,以期为rEg.P29免疫前后宿主免疫细胞的分化研究提供线索.方法 将6-8周龄SPF级BALB/c小鼠随机分为2组,rEg.P29免疫组和对照组,每组12只.rEg.P29免疫组于小鼠腹部多点免疫重组蛋白100 μl(含rEg.P29 10μg),共免疫2次,第1次免疫2周后进行第2次免疫.提取第2周(第1次免疫后2周)、第6周(第1次免疫后4周)、第8周(第1次免疫后6周)各组小鼠外周血淋巴细胞,分离microRNA用于建库测序,利用生物信息学方法筛选rEg.P29诱导下差异表达的microRNA分子,并进行注释分析.结果 测序所得数据经拼接组装比对,共获得成熟的microRNA序列342条,其中已知的microRNA序列206条,未知信息序列36条.在已知的microRNA分子中,差异表达共55个,其中上调31个,下调24个;在新发现的microRNA分子中,差异表达11个,其中上调5个,下调6个.靶基因预测结果显示,表达上调microRNA调控的靶基因有14 279个,表达下调microRNA调控的靶基因13 911个.GO富集注释结果显示,在上调分子中,生物学进程(BP)获得18条注释信息,其中16个microRNA调控的826个靶基因被注释到细胞分化(cell differ-entiation)条目下;在下调分子中,生物学进程(BP)获得21条注释信息,其中25个microRNA调控的712个靶基因被注释到细胞分化(cell differentiation)条目下.KEGG通路分析结果显示,无论是表达上调还是下调的分子,其靶基因的代谢通路均显著富集到 Th1 and Th2 cell differentiation Th17 cell differentiation B cell receptor signaling pathway 等与细胞分化相关的信号通路以及与肿瘤相关的信号通路上.结论 在rEg.P29诱导下小鼠免疫细胞存在差异表达的mi-croRNA 分子,这些分子可能与免疫细胞的分化相关.
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