【摘 要】
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目的探讨食管鳞状细胞癌患者放疗前后血浆miRNA-210（miR-210）表达的变化及其体外对食管鳞状细胞癌细胞增殖、细胞周期和细胞凋亡的影响。方法收集2013年12月至2015年3月山东省临沂市人民医院22例初治食管鳞状细胞癌患者（食管癌组）根治性放疗前后及15名健康志愿者（健康对照组）血液标本。以miRNA-21（miR-21）为阳性对照。应用实时荧光定量聚合酶链反应（RT-PCR）检测患者放
【机 构】
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山东省临沂市人民医院肿瘤科 276000,解放军总医院第七医学中心放射治疗科，北京 100071,山东省临沂市人民医院感染科 276000
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目的探讨食管鳞状细胞癌患者放疗前后血浆miRNA-210（miR-210）表达的变化及其体外对食管鳞状细胞癌细胞增殖、细胞周期和细胞凋亡的影响。
方法收集2013年12月至2015年3月山东省临沂市人民医院22例初治食管鳞状细胞癌患者（食管癌组）根治性放疗前后及15名健康志愿者（健康对照组）血液标本。以miRNA-21（miR-21）为阳性对照。应用实时荧光定量聚合酶链反应（RT-PCR）检测患者放疗前后血浆miR-210和miR-21的表达水平及常氧和乏氧食管鳞状细胞癌Eca109细胞中miR-210的表达。采用EdU细胞增殖实验、流式细胞术检测未转染组（空白对照组）、转染miR-210模拟物阴性对照RNA组（阴性对照组）、转染miR-210模拟物RNA组（miR-210组）Eca109细胞增殖、细胞周期和细胞凋亡情况。
结果食管癌组及健康对照组共采集合格血液样本59份。食管癌组放疗前血浆miR-210、miR-21的相对表达量[中位数（P25，P75）]较健康对照组升高，差异均有统计学意义[4.04×10-4（2.06×10-4，6.68×10-4）比0.54×10-4（0.28×10-4，0.77×10-4），397.07×10-4（181.77×10-4，742.93×10-4）比127.43×10-4（21.97×10-4，184.65×10-4）；U值分别为37.0、49.0，均P<0.01]。食管癌组患者治疗前血浆miR-210、miR-21表达水平与肿瘤部位和分化程度均无关（均P>0.05）。根治性放疗1周后，食管癌组血浆miR-210、miR-21的相对表达量分别为65.33×10-4（22.15×10-4，160.87×10-4）、437.23×10- 4（327.18×10-4，749.09×10-4），均较放疗前升高（U值分别为32.0、154.0，均P<0.05），其中miR-210升高更为显著。Eca109细胞乏氧培养12 h后, miR-210的表达水平较常氧组增高，24 h后达峰值，差异有统计学意义（P<0.01）。EdU细胞增殖实验显示，miR-210组转染24、48 h后Eca109细胞增殖活力较阴性对照组和空白对照组均下降，差异均有统计学意义（均P<0.01）。流式细胞术分析显示，转染24 h后，同阴性对照组和空白对照组相比，miR-210组Eca109细胞G2/M期比例增高，差异有统计学意义（P<0.05）；转染48 h后，G2/M期比例增高更明显（P<0.01）；转染24、48 h后，三组凋亡细胞比例差异均无统计学意义（均P>0.05）。
结论miR-210在食管鳞状细胞癌患者血浆中高表达，尤其是在根治性放疗后血浆miR-210表达水平明显升高。miR-210在乏氧食管鳞状细胞癌Eca109细胞中高表达，miR-210过表达可抑制细胞增殖，其机制可能与G2/M期阻滞相关。
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