粘虫核型多角体病毒919bp片段的PCR双链直接序列测定

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本文发展了PCR克隆和亚克隆技术制备DNA测序模板。首先,我们用pUC/M13系列质粒的通用正反向引物PCR扩增出质粒pBluescriptKS DNA的多克隆位点及其侧冀序列,用EcoRV和XhoI消化成为左右两个引物多克隆臂,与粘虫核多角体病毒(LsNPV)的EooRV和XhoI约400bp和500bp片段分别连接,经PCR扩增,得到两端具有上述正反向引物结合位点的测序模板,用ddNTP链终点
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