检测牛IFN-γ双抗体夹心ELISA的建立及在牛结核病诊断上的初步应用

• 作 者: 张改梅 贾红 侯绍华 鑫婷 郭晓宇 袁维峰 刘淑清 吴竞 高
• 机 构: 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所,中国农业科学院研究生院
• 出 处: 畜牧兽医学报
• 发表日期: 2014年10期
• 关键词: 牛结核病 IFN-Γ 双抗体夹心ELISA 临床诊断 bovine tuberculosis IFN-γ double antibody sandwich
• 基金项目: 国家863计划项目(2012AA101302),中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金项目(2014ywf-zd-1),中国农业科学院科技创新工程(ASTIP-IAS-11)

本研究旨在建立牛IFN-γ体外释放法,为牛结核病的免疫学诊断提供一种快速、有效的新检测技术。分别以获得的牛IFN-γ单克隆抗体Bo-mAb1作为捕获抗体,以Bo-mAb2H作为检测抗体,建立了基于双抗体夹心ELISA(DAS-ELISA)的牛IFN-γ体外释放法。该方法的最低检出限为3.12ng·mL-1,可特异性检测出重组牛IFN-γ(Bac-BoIFN-γ)及天然BoIFN-γ,而与猪、犬、鸡的天然IFN-γ无交叉反应。批内、批间变异系数小于5.11%。临床检测结果显示,与结核菌素皮内变态试