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目的探讨昆明种小鼠胚胎干细胞的分离、培养和鉴定。方法收集小鼠14—16d胚龄的囊胚,以小鼠胚胎成纤维细胞作为饲养层,形成的胚胎干细胞(ES)细胞样集落,分离隆起生长的胚胎内细胞团并继续培养,观察集落的生长状态,通过碱性磷酸酶染色进行的分析鉴定,并对其体外分化能力进行检测。结果共培养收集74个昆明小鼠的囊胚,其中有53个囊胚的内细胞团(ICM)离散程度较强;ES细胞集落的特征呈鸟巢状,其细胞圆小,细胞核大,排列紧密,边缘清晰,细胞之间的界限不清楚;碱性磷酸酶(AKP)染色呈阳性,集落呈红棕色或蓝色,成纤维细