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将发芽盒内培养2~3周的甜菜子叶,在CPW 12M高渗溶液中预质壁分离4h后用2%Cellulase Onozuk K-10+0.5%Macerozyme+0.5%Driselase+CPW 9M酶液酶解12h。原生质体在K8P+2.4-D 2.0mg/L+6-BA 0.5mg/L培养基中液体浅层培养。6周内形成大量的多细胞团和微愈伤组织,进一步培养,形成直径为0.5cm左右松散的大块愈伤组织。