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摘要：目的对百叶尖的根茎进行生药学研究，为其鉴别及进一步研究开发提供参考依据。方法采用来源鉴别、性状鉴别、显微鉴别、理化鉴别及薄层色谱鉴别方法。结果原植物形态主要特征为叶片为一回羽状复叶，倒披针形，侧生羽片约30-50对，叶片向基部逐渐收缩。药材性状主要特征为根茎表面密被黄棕色、线状披针形鳞片。显微鉴别主要特征为根茎横切面中柱为双韧管状中柱，分体中柱“U”型，木质部由管胞组成，其内外均有韧皮部及内皮层；粉末特征淀粉粒甚多，单粒圆形或椭圆形，脐点点状或裂缝状，层纹不明显；复粒由2～3个分粒组成；梯纹及网纹管胞多见。系统预试验表明其可能含有皂苷、还原糖、苷类、黄酮类、内脂、甾醇、酚性成分、萜类、挥发油等成分；薄层色谱中，药材在相应位置上显示相同颜色的荧光斑点，重现性较好。结论所得结果可为百叶尖的鉴定、该药的质量标准制定及进一步深入研究和开发利用提供一定的理论依据。
关键词：百叶尖；生药学；薄层色谱
中图分类号：R932文献标志码：A文章编号：1007-2349（2017）09-0065-03
【Abstract】Objective： To make pharmacognostical study of rhizomes of Pteris vittata and to provide reference for their identification and further research and development. Methods： Source identification， character identification， microscopic identification， physical and chemical identification and thin layer chromatography were used. Results： The main features of original plant leaves were bout pinnately compound leaf， oblanceolate， lateral leaflets about 30-50 pairs， with its leaf blade gradual contraction to the base. The main features of medicinal properties for the rhizome surface were densely yellow-brown and linear lanceolate scales. The main features of microscopic identification were the mid-column of root cross-section was bicollateral siphonostele， U-type splitting column， and xylem consisted of trachea， phloem and endocarp both inside and outside. The powder characteristics were more starch grain， granular or oval， umbilical point-like or crack-like， with unclear annular striation. Complex particles constitute from 2 to 3 sub-compositions， with more ladder and reticular cells. Systemic pre-test showed it may contain saponins， reducing sugar， glycosides， flavonoids， lactones， sterols， phenolic compounds， terpenoids， volatile oil and other components. In thin layer chromatography， the medical materials displayed the same fluorescent spots in corresponding position， with better reproducibility. Conclusion： The results can provide some theoretical basis for the identification and quality standard making of Pteris vittata and its further research and development.
【Key words】Pteris vittata， pharmacognosy， thin layer chromatography
百葉尖为凤尾蕨科植物蜈蚣草（Pteris vittata Linnaeus）的根茎。广布于秦岭以南各省区及台湾，云南各地均有分布，生于海拔3100 m以下的林缘或路边石缝中[1]。又名蜈蚣蕨、小贯众、长叶甘草蕨、肺筋草、牛肋巴等[2]，《滇南本草》有收载：“百叶尖，生山中石上，绿色，一条小叶，俗呼蜈蚣草。味酸、涩、甘。无毒。治一切跌打损伤，筋骨疼痛，四肢麻木，风湿痿软。泡酒服之，其效如神。敷伤亦可……”[3]。其味酸、涩、甘，性平。具祛风除湿，舒筋活络，解毒杀虫之功。用于蜈蚣咬伤，痢疾，流感，风湿疼痛，跌打损伤，无名肿痛，疥疮[2，4]，又可作为清热解毒及利尿通淋药。用于防治流行性感冒，痢疾，风湿疼痛；外用于蜈蚣咬伤[5]。
经查阅文献资料，目前对本品的研究主要集中于杀虫、抗氧化活性等药效学研究[6-8]，而对其进行生药学研究尚属空白。百叶尖资源丰富，疗效确切，为了使其得以充分的开发利用，对其进行了初步系统的生药学研究，为其质量标准制定及深入研究和开发利用提供一定的理论依据。 1实验材料及仪器
1.1实验材料实验药材采自云南大理永平、昭通永善、怒江泸水、普洱江城。经云南省药物研究所戚育芳正高级工程师鉴定为蜈蚣草Pteris vittata Linnaeus的根茎。
1.2试剂5%硫酸溶液、10%氢氧化钠、0.5%硫酸铜溶液、0.2%茚三酮溶液、鞣酸试剂、氯化钠明胶试剂、1%三氯化铁乙醇溶液、5%α-萘酚乙醇溶液、碱性酒石酸铜试剂、乙醇、浓硫酸、麝香草酚兰、2%三氯化铝甲醇溶液、浓盐酸、镁粉、30%过氧化氢、10%醋酸镁甲醇溶液、1%氢氧化钠溶液、甲醇、3，5-二甲基苯甲酸、碱性苦味酸试剂、7%异羟胺甲醇溶液、10%氢氧化钾甲醇、5%盐酸、5%氢氧化钠、0.5%碳酸钠水溶液、冰醋酸、醋酸酐-浓硫酸试剂、氯仿、碱性氢氧化钠乙醇液、间二硝基苯、香草醛-浓硫酸、3%碳酸钠、重氮化试剂、三氯化铁-铁氰化钾试剂、5%氢氧化铵溶液、硅钨酸试剂、碘-碘化钾试剂、碘化铋钾试剂、苦味酸试剂、乙醚、无水硫酸钠、10%硫酸乙醇、石油醚、乙酸乙酯、香草醛-浓硫酸、羧甲基纤维素钠、70%乙醇、80%乙醇、95%乙醇、100%无水乙醇、TO型生物透明剂、0.1%固绿、0.5%番红、石蜡、生物组织固定液。
1.3仪器FA2004N电子分析天平，BM-IX生物组织冷冻包埋机，CS-Ⅳ型摊片烤片机，QP-Ⅲ生物组织切片机，TS-12A生物组织自动脱水机，MicrE400 Nikon显微镜，数码显微照相机，GZX-9030 MBE 数显鼓风干燥箱，101A-2E电热鼓风干燥箱，生物组织摊片烤片机（CS-Ⅳ型），生物组织刀刃磨机（MD-Ⅱ型），超声波清洗器（SK3200LHC）、ZF-Ⅰ型三用紫外分析仪。
2实验方法
按常规植物分类学方法和药材鉴定方法，制作百叶尖的根茎横切面永久装片及粉末制片等方法进行观察描述和分析，并进行化学预试验及薄层色谱实验。
3原植物鉴别
根状茎短而直立，直径约1～5 cm，顶端密被披针形、黄棕色鳞片；叶簇生，同型。叶柄长度变化较大，通常在10～20 cm之间，基部密被披针形、黄棕色、長约1cm的鳞片，向上鳞片变少和变小，叶柄上部至叶轴禾秆色，疏被毛状鳞片。叶片一回羽状，倒披针形，长约30～80 cm，宽约10～20 cm。裂片约30～50对，互生或近对生，披针形，基部浅心形，无柄，覆盖叶轴，顶端渐尖，边缘有锯齿。叶脉分离，侧脉单一或二分叉，纤细而密。叶草质，暗绿色，除叶轴和中脉疏被毛状浅棕色鳞片外，两面光滑无毛。孢子囊群线形，沿叶缘着生，具有由羽片边缘反卷形成的膜质、近全缘的假囊群盖[1]（见图1）。
4性状鉴别
根茎短粗，形似蜈蚣，长约6～8cm，直径约1～2cm，表面黄棕色至棕褐色，密被黄棕色、线状披针形鳞片，上面具多数枯叶柄及棕黑色须根。质地坚硬，不易折断，断面黄白色，可见“U”型筋脉纹或不规则脉纹。气微腥，味甘、酸、辛、平（见图2）。
5显微鉴别
5.1根茎横切面表皮细胞1列，细胞较小，外壁增厚，常脱落；下表皮为数列厚壁细胞，棕色至褐色，壁孔明显，内含淀粉粒；中柱为双韧管状中柱，分体中柱“U”型，木质部由管胞组成，其内外均有韧皮部及内皮层；皮层及髓部薄壁细胞中含有淀粉粒与棕色块（见图3）。
5.2粉末特征根茎粉末黄棕色；①管胞多为梯纹及网纹，直径25～50 μm。②淀粉粒甚多，单粒圆形或椭圆形，直径12～30 μm，脐点点状或裂缝状，层纹不明显；复粒由2～3分粒组成。③色素块条状、三角形或不规则形，红棕色或深棕色（见图4）。
6理化鉴别
经系统预实验，百叶尖含有皂苷、还原糖、苷类、黄酮类、内脂、甾醇、酚性成分、萜类、挥发油等成分。
7薄层鉴别
系统预试验的结果表明百叶尖根茎药材含有皂苷、还原糖、苷类、黄酮类、内脂、甾醇、酚性成分、萜类、挥发油等成分。根据理化预试验结果，选取了黄酮类、内酯，萜类三种成分进行薄层色谱实验。
参照薄层色谱法（《中华人民共和国药典》2015年版四部通则0502）[9]，吸取上述供试品溶液各10 μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚：乙酸乙酯：甲醇（15：5：3）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在电热鼓风干燥箱105℃加热至斑点显色清晰，置紫外光灯（365 nm）下检视。药材溶液在同一硅胶G板相应位置上显相同颜色的斑点（见图5）。
8小结与讨论
通过对百叶尖植物形态、药材性状、显微鉴定等方面的研究，出其在各鉴定项中均有明显的鉴定特征：
原植物形态侧生羽片多数，通常可达30-40对，向下渐缩短，不育边缘有密细锯齿；药材性状根茎短粗，形似蜈蚣，断面可见“U”型筋脉纹或不规则脉纹；显微横切面特征中柱为双韧管状中柱，分体中柱“U”型，木质部由管胞组成，其内外均有韧皮部及内皮层，粉末特征淀粉粒甚多，单粒圆形或椭圆形，脐点点状或裂缝状，层纹不明显；复粒由2～3个分粒组成；梯纹及网纹管胞多见。
实验中，其脱水过程中为使组织不破碎脱落需掌握好时间；在包埋过程中要使药材充分溶蜡，在切片过程中才能使其完整。摊片时间延长，使药材完全摊平，便于染色；其次是染色过程要把握好在番红和固绿中染色的时间，使制作的永久制片清晰美观。在做薄层色谱实验时，展开剂的选择较为关键。本次实验结果图片清晰，数据准确，为该药的鉴定、药材标准制定、进一步研究和开发利用提供了理论依据。
参考文献：
[1]中国科学院昆明植物研究所编著.云南植物志[M].北京：科学出版社 2006：246-248.
[2]国家中医药管理局《中华本草》编委会.中华本草[M].上海：上海科学技术出版社，2004.
[3]明.兰茂，于乃义整理.滇南本草[M].昆明：云南科技出版社，2004：667-668.
[4]云南省药物研究所.云南天然药物图鉴[M].昆明：云南科技出版社，2007：470.
[5]全国中草药汇编编写组.全国中草药汇编[M].北京：人民出版社出版，1983.
[6]廖凤仙，王兰英，骆焱平.蜈蚣草提取物杀虫活性初步研究[J].中国植保导刊，2013，33（3）：12-15.
[7]周向军，高义霞，杨宗琪，等.蜈蚣草总黄酮体外抗氧化作用的研究[J].资源开发与市场，2010，26（4）：294-296.
[8]侯文成，韩丹丹，陈曼丽，等.蜈蚣草甲醇提取物的抗氧化活性研究[D].湖南农业大学学报（自然科学版），2016，42（4）：441-444.
[9]国家药典委员会编.中华人民共和国药典[M].北京：中国医药科技出版社，2015：306-307.
关键词：百叶尖；生药学；薄层色谱
中图分类号：R932文献标志码：A文章编号：1007-2349（2017）09-0065-03
【Abstract】Objective： To make pharmacognostical study of rhizomes of Pteris vittata and to provide reference for their identification and further research and development. Methods： Source identification， character identification， microscopic identification， physical and chemical identification and thin layer chromatography were used. Results： The main features of original plant leaves were bout pinnately compound leaf， oblanceolate， lateral leaflets about 30-50 pairs， with its leaf blade gradual contraction to the base. The main features of medicinal properties for the rhizome surface were densely yellow-brown and linear lanceolate scales. The main features of microscopic identification were the mid-column of root cross-section was bicollateral siphonostele， U-type splitting column， and xylem consisted of trachea， phloem and endocarp both inside and outside. The powder characteristics were more starch grain， granular or oval， umbilical point-like or crack-like， with unclear annular striation. Complex particles constitute from 2 to 3 sub-compositions， with more ladder and reticular cells. Systemic pre-test showed it may contain saponins， reducing sugar， glycosides， flavonoids， lactones， sterols， phenolic compounds， terpenoids， volatile oil and other components. In thin layer chromatography， the medical materials displayed the same fluorescent spots in corresponding position， with better reproducibility. Conclusion： The results can provide some theoretical basis for the identification and quality standard making of Pteris vittata and its further research and development.
【Key words】Pteris vittata， pharmacognosy， thin layer chromatography
百葉尖为凤尾蕨科植物蜈蚣草（Pteris vittata Linnaeus）的根茎。广布于秦岭以南各省区及台湾，云南各地均有分布，生于海拔3100 m以下的林缘或路边石缝中[1]。又名蜈蚣蕨、小贯众、长叶甘草蕨、肺筋草、牛肋巴等[2]，《滇南本草》有收载：“百叶尖，生山中石上，绿色，一条小叶，俗呼蜈蚣草。味酸、涩、甘。无毒。治一切跌打损伤，筋骨疼痛，四肢麻木，风湿痿软。泡酒服之，其效如神。敷伤亦可……”[3]。其味酸、涩、甘，性平。具祛风除湿，舒筋活络，解毒杀虫之功。用于蜈蚣咬伤，痢疾，流感，风湿疼痛，跌打损伤，无名肿痛，疥疮[2，4]，又可作为清热解毒及利尿通淋药。用于防治流行性感冒，痢疾，风湿疼痛；外用于蜈蚣咬伤[5]。
经查阅文献资料，目前对本品的研究主要集中于杀虫、抗氧化活性等药效学研究[6-8]，而对其进行生药学研究尚属空白。百叶尖资源丰富，疗效确切，为了使其得以充分的开发利用，对其进行了初步系统的生药学研究，为其质量标准制定及深入研究和开发利用提供一定的理论依据。 1实验材料及仪器
1.1实验材料实验药材采自云南大理永平、昭通永善、怒江泸水、普洱江城。经云南省药物研究所戚育芳正高级工程师鉴定为蜈蚣草Pteris vittata Linnaeus的根茎。
1.2试剂5%硫酸溶液、10%氢氧化钠、0.5%硫酸铜溶液、0.2%茚三酮溶液、鞣酸试剂、氯化钠明胶试剂、1%三氯化铁乙醇溶液、5%α-萘酚乙醇溶液、碱性酒石酸铜试剂、乙醇、浓硫酸、麝香草酚兰、2%三氯化铝甲醇溶液、浓盐酸、镁粉、30%过氧化氢、10%醋酸镁甲醇溶液、1%氢氧化钠溶液、甲醇、3，5-二甲基苯甲酸、碱性苦味酸试剂、7%异羟胺甲醇溶液、10%氢氧化钾甲醇、5%盐酸、5%氢氧化钠、0.5%碳酸钠水溶液、冰醋酸、醋酸酐-浓硫酸试剂、氯仿、碱性氢氧化钠乙醇液、间二硝基苯、香草醛-浓硫酸、3%碳酸钠、重氮化试剂、三氯化铁-铁氰化钾试剂、5%氢氧化铵溶液、硅钨酸试剂、碘-碘化钾试剂、碘化铋钾试剂、苦味酸试剂、乙醚、无水硫酸钠、10%硫酸乙醇、石油醚、乙酸乙酯、香草醛-浓硫酸、羧甲基纤维素钠、70%乙醇、80%乙醇、95%乙醇、100%无水乙醇、TO型生物透明剂、0.1%固绿、0.5%番红、石蜡、生物组织固定液。
1.3仪器FA2004N电子分析天平，BM-IX生物组织冷冻包埋机，CS-Ⅳ型摊片烤片机，QP-Ⅲ生物组织切片机，TS-12A生物组织自动脱水机，MicrE400 Nikon显微镜，数码显微照相机，GZX-9030 MBE 数显鼓风干燥箱，101A-2E电热鼓风干燥箱，生物组织摊片烤片机（CS-Ⅳ型），生物组织刀刃磨机（MD-Ⅱ型），超声波清洗器（SK3200LHC）、ZF-Ⅰ型三用紫外分析仪。
2实验方法
按常规植物分类学方法和药材鉴定方法，制作百叶尖的根茎横切面永久装片及粉末制片等方法进行观察描述和分析，并进行化学预试验及薄层色谱实验。
3原植物鉴别
根状茎短而直立，直径约1～5 cm，顶端密被披针形、黄棕色鳞片；叶簇生，同型。叶柄长度变化较大，通常在10～20 cm之间，基部密被披针形、黄棕色、長约1cm的鳞片，向上鳞片变少和变小，叶柄上部至叶轴禾秆色，疏被毛状鳞片。叶片一回羽状，倒披针形，长约30～80 cm，宽约10～20 cm。裂片约30～50对，互生或近对生，披针形，基部浅心形，无柄，覆盖叶轴，顶端渐尖，边缘有锯齿。叶脉分离，侧脉单一或二分叉，纤细而密。叶草质，暗绿色，除叶轴和中脉疏被毛状浅棕色鳞片外，两面光滑无毛。孢子囊群线形，沿叶缘着生，具有由羽片边缘反卷形成的膜质、近全缘的假囊群盖[1]（见图1）。
4性状鉴别
根茎短粗，形似蜈蚣，长约6～8cm，直径约1～2cm，表面黄棕色至棕褐色，密被黄棕色、线状披针形鳞片，上面具多数枯叶柄及棕黑色须根。质地坚硬，不易折断，断面黄白色，可见“U”型筋脉纹或不规则脉纹。气微腥，味甘、酸、辛、平（见图2）。
5显微鉴别
5.1根茎横切面表皮细胞1列，细胞较小，外壁增厚，常脱落；下表皮为数列厚壁细胞，棕色至褐色，壁孔明显，内含淀粉粒；中柱为双韧管状中柱，分体中柱“U”型，木质部由管胞组成，其内外均有韧皮部及内皮层；皮层及髓部薄壁细胞中含有淀粉粒与棕色块（见图3）。
5.2粉末特征根茎粉末黄棕色；①管胞多为梯纹及网纹，直径25～50 μm。②淀粉粒甚多，单粒圆形或椭圆形，直径12～30 μm，脐点点状或裂缝状，层纹不明显；复粒由2～3分粒组成。③色素块条状、三角形或不规则形，红棕色或深棕色（见图4）。
6理化鉴别
经系统预实验，百叶尖含有皂苷、还原糖、苷类、黄酮类、内脂、甾醇、酚性成分、萜类、挥发油等成分。
7薄层鉴别
系统预试验的结果表明百叶尖根茎药材含有皂苷、还原糖、苷类、黄酮类、内脂、甾醇、酚性成分、萜类、挥发油等成分。根据理化预试验结果，选取了黄酮类、内酯，萜类三种成分进行薄层色谱实验。
参照薄层色谱法（《中华人民共和国药典》2015年版四部通则0502）[9]，吸取上述供试品溶液各10 μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚：乙酸乙酯：甲醇（15：5：3）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在电热鼓风干燥箱105℃加热至斑点显色清晰，置紫外光灯（365 nm）下检视。药材溶液在同一硅胶G板相应位置上显相同颜色的斑点（见图5）。
8小结与讨论
通过对百叶尖植物形态、药材性状、显微鉴定等方面的研究，出其在各鉴定项中均有明显的鉴定特征：
原植物形态侧生羽片多数，通常可达30-40对，向下渐缩短，不育边缘有密细锯齿；药材性状根茎短粗，形似蜈蚣，断面可见“U”型筋脉纹或不规则脉纹；显微横切面特征中柱为双韧管状中柱，分体中柱“U”型，木质部由管胞组成，其内外均有韧皮部及内皮层，粉末特征淀粉粒甚多，单粒圆形或椭圆形，脐点点状或裂缝状，层纹不明显；复粒由2～3个分粒组成；梯纹及网纹管胞多见。
实验中，其脱水过程中为使组织不破碎脱落需掌握好时间；在包埋过程中要使药材充分溶蜡，在切片过程中才能使其完整。摊片时间延长，使药材完全摊平，便于染色；其次是染色过程要把握好在番红和固绿中染色的时间，使制作的永久制片清晰美观。在做薄层色谱实验时，展开剂的选择较为关键。本次实验结果图片清晰，数据准确，为该药的鉴定、药材标准制定、进一步研究和开发利用提供了理论依据。
参考文献：
[1]中国科学院昆明植物研究所编著.云南植物志[M].北京：科学出版社 2006：246-248.
[2]国家中医药管理局《中华本草》编委会.中华本草[M].上海：上海科学技术出版社，2004.
[3]明.兰茂，于乃义整理.滇南本草[M].昆明：云南科技出版社，2004：667-668.
[4]云南省药物研究所.云南天然药物图鉴[M].昆明：云南科技出版社，2007：470.
[5]全国中草药汇编编写组.全国中草药汇编[M].北京：人民出版社出版，1983.
[6]廖凤仙，王兰英，骆焱平.蜈蚣草提取物杀虫活性初步研究[J].中国植保导刊，2013，33（3）：12-15.
[7]周向军，高义霞，杨宗琪，等.蜈蚣草总黄酮体外抗氧化作用的研究[J].资源开发与市场，2010，26（4）：294-296.
[8]侯文成，韩丹丹，陈曼丽，等.蜈蚣草甲醇提取物的抗氧化活性研究[D].湖南农业大学学报（自然科学版），2016，42（4）：441-444.
[9]国家药典委员会编.中华人民共和国药典[M].北京：中国医药科技出版社，2015：306-307.