肝癌细胞线粒体蛋白的MALDI-TOF质谱鉴定方法研究

• 作 者: 蒋代凤 邱宗荫 李兴 黄开顺 滕永真 张晓萍
• 机 构: 重庆医科大学医学检验系实验诊断教研室,重庆医科大学基础医学研究所
• 出 处: 重庆医科大学学报
• 发表日期: 2005年4期
• 关键词: 线粒体 蛋白质组学 肽质量指纹图(PMF) 基质辅助激光解吸离子化-飞行时间质谱(MALDI-TOF MASS) 二维电泳(2-DE) Mitochondria

目的:探索胶上蛋白原位酶切、肽质量指纹图(PMF)分析以及数据库检索方法的优化条件,建立适合于亚细胞比较蛋白质组学研究的质谱鉴定策略.方法:从考马斯亮蓝染色的2-DE胶上取下牛血清白蛋白(BSA)标准蛋白进行胶内原位酶切,与基质(CHCA)混匀后进行MALDI-TOF MS分析;对来源于人肝细胞癌细胞株QGY-7703线粒体的差异表达的候选蛋白点L9,按照通过BSA标准蛋白优化的条件进行MALDI-TOF质谱鉴定;其肽质量指纹图(PMF)经MS-Fit检索.结果:经数据库检索,BSA的肽质量指纹图(PMF