【摘 要】
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为了建立方便、敏感和特异的SARS病毒血清学诊断方法，利用PCR扩增，克隆了SARS冠状病毒S蛋白基因中从第68～918位碱基的基因序列（S1蛋白）．并通过pGEX-4T1表达系统在大肠杆菌BL21中高
【基金项目】
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清华大学生物膜与膜生物工程国家重点实验室开放课题（A2004016）
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为了建立方便、敏感和特异的SARS病毒血清学诊断方法，利用PCR扩增，克隆了SARS冠状病毒S蛋白基因中从第68～918位碱基的基因序列（S1蛋白）．并通过pGEX-4T1表达系统在大肠杆菌BL21中高效表达了SARS病毒S1蛋白，用超声波破碎菌体及用不同浓度的尿素洗涤包涵体，纯化了S1蛋白，纯度可达75％以上．以在E．coli高效表达的S1蛋白为抗原，以辣根过氧化物酶（HRP）标记的羊抗人IgG为二抗，建立了检测SARS抗体的间接ELISA方法．经检测，筛选出最佳反应条件为5μg／孔．用纯化的E．col
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