【摘 要】
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为建立一种准确、快速、敏感性更高的小反刍兽疫病毒(peste des petits ruminants virus,PPRV)检测方法,建立了一种芯片式数字PCR(cdPCR)检测方法.根据GenBank中公布的PPRV Nigeria75/1疫苗株N基因序列设计1对引物,PCR扩增大小为166 bp片段,构建pMDTM18-N标准质粒并优化反应条件,建立了PPRV N基因cdPCR检测方法,并与实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测方法的灵敏性、重复性、特异性和临床样品检测做了比较分析.结果显示:当质
【机 构】
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中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,兽医生物技术国家重点实验室/自然疫源性人畜共患病团队,黑龙江哈尔滨 150001;东北农业大学动物医学院,黑龙江哈尔滨 150030
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为建立一种准确、快速、敏感性更高的小反刍兽疫病毒(peste des petits ruminants virus,PPRV)检测方法,建立了一种芯片式数字PCR(cdPCR)检测方法.根据GenBank中公布的PPRV Nigeria75/1疫苗株N基因序列设计1对引物,PCR扩增大小为166 bp片段,构建pMDTM18-N标准质粒并优化反应条件,建立了PPRV N基因cdPCR检测方法,并与实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测方法的灵敏性、重复性、特异性和临床样品检测做了比较分析.结果显示:当质粒标准品浓度在1.22×(105～102)copies/μL范围时,cdPCR检测方法比普通RT-PCR灵敏度高1000倍,且稳定性好,特异性强;当标准品浓度在1.22×(105～10-3)copies/μL范围时,cdPCR与RT-qPCR相比具有相同的特异性,但灵敏性比RT-qPCR高100倍;与RT-qPCR测定结果(13.29±6.74)copies/μL相比,cdPCR的最低检测限更低,约为(0.44±0.14)copies/μL;cdPCR对47份临床样本的PPRV核酸阳性检出率(25.5％)高于RT-qPCR(17.0％).结果表明,建立的cdPCR方法特异性强、灵敏度高、重复性好,为预防PPR早期流行提供了一种快速有效的诊断和定量检测方法.
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为掌握山西省长子县O型口蹄疫的免疫抗体水平,评估其免疫效果,2018—2020年在全县14个乡镇的规模场和散养户,随机采集2258个场户的12186份血清样品,采用阻断ELISA法检测口蹄疫免疫抗体,并对检测结果进行时间、群间和空间分布分析.结果显示:2018—2020年全县平均场户免疫合格率为81.18％,个体免疫合格率为85.21％.其中:2020年抗体合格率最低,场户和个体免疫合格率分别为70.27％和79.78％,与其他年份差异显著(P<0.05);规模场场户合格率和个体免疫合格率分别为87.25
2019年12月31日,新疆伊宁县报告出现天鹅异常死亡情况.经观察临床症状、剖检病理变化,结合地州级、自治区级兽医实验室复检,诊断为疑似H5型流感疫情,后经国家禽流感参考实验室进行亚型鉴定,确诊为高致病性H5N6亚型流感疫情.为确定疫情分布,分析疫情扩散风险,并提出针对性防控建议,通过现场勘查、访谈,并结合实验室检测,进行了紧急流行病学调查.调查认为,携带病毒的迁徙天鹅遭遇强冷空气可能是导致本次疫情发生的主要原因.本次野鸟疫情未发现向家禽扩散,但应高度重视饲养家禽的生物安全管理工作,避免家禽与野禽接触.
为定量估计我国2000年以来猪旋毛虫感染情况,检索中英文数据库,筛选整理猪旋毛虫流行情况相关文献,并提取数据进行定量分析.共入选28篇文献,涉及全国9个省份.结果显示:采用ELISA法共检测124088份样品,阳性率为2.54％(95％CI:1.55％～3.57％);压片镜检法共检测130267份样品,阳性率为0.17％(95％CI:0.06％～0.34％).2000年以来猪旋毛虫检出率逐渐降低,华南和西北地区检出率较高,农村饲养生猪检出率略高于商品场,农贸市场猪肉样品中也有检出.结果表明,我国猪群旋毛虫
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