【摘 要】
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目的 研究阿托伐他汀对白细胞介素-6(IL-6)诱导的HK-2细胞增殖和Ⅳ型胶原、纤粘连蛋白(FN)分泌的影响及相关分子机制.方法 以不同浓度IL-6作用HK-2细胞24,48,72 h,以化学发光
【机 构】
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西南医科大学附属医院肾病内科,四川泸州646000;四川省肾脏疾病临床医学研究中心,四川泸州646000;成都市第二人民医院,四川成都,610000;西南医科大学医学电生理学重点实验室,四川泸州,64
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目的 研究阿托伐他汀对白细胞介素-6(IL-6)诱导的HK-2细胞增殖和Ⅳ型胶原、纤粘连蛋白(FN)分泌的影响及相关分子机制.方法 以不同浓度IL-6作用HK-2细胞24,48,72 h,以化学发光法检测上清液FN、Ⅳ型胶原含量,以噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖情况.基于以上实验,选定5 ng· mL-1IL-6刺激浓度为模型组,时间为48 h,并另设对照组、实验组(1×10-5mol·L-1阿托伐他汀).培养48 h后以MTT法检测细胞增殖,以化学发光法检测上清液FN、Ⅳ型胶原的含量,以Western blot检测转化生长因子-β1(TGF-β1)、结缔组织生长因子(CTGF)蛋白的表达,以逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测TGF-β1、CTGF mRNA表达.结果 HK-2细胞的增殖和FN、Ⅳ型胶原的分泌随着IL-6浓度及作用时间的增加而逐渐增加.对照组、模型组、实验组细胞增殖OD值分别为0.60±0.06,0.77±0.13,0.61±0.07;Ⅳ型胶原含量分别为(7.43± 0.54),(12.41±1.30),(9.74±0.99) ng·mL-1;FN含量为(14.77±1.80),(28.21±2.41),(20.72±1.03)ng·mL-1;CTGF蛋白相对表达量分别为0.41±0.03,1.28±0.04,0.85±0.10;TGF-β1蛋白相对表达量0.60±0.03,1.25±0.21,0.82±0.03;CTGF mRNA相对表达量分别为0.49±0.03,1.98±0.14,1.19±0.12;TGF-β1 mRNA相对表达量分别为0.75±0.05,1.52±0.17,1.07±0.09.模型组与对照组和实验组比较,差异均有统计学意义(均P＜0.01).结论 阿托伐他汀可能通过抑制TGF-β1/CTGF信号通路,抑制IL-6诱导的HK-2细胞增殖及细胞外基质分泌作用,从而干预肾间质纤维化.
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