【摘 要】
：
目的:将反义的皮层肌动蛋白(cortactin)基因转染入人肝癌细胞中,观察其表达效果及其对细胞本身的影响以及该基因在肝癌细胞转移中的作用.方法:Trizol试剂法提取体外培养的人
【机 构】
：
第四军医大学西京医院肝胆外科,陕西,西安,710032
论文部分内容阅读
目的:将反义的皮层肌动蛋白(cortactin)基因转染入人肝癌细胞中,观察其表达效果及其对细胞本身的影响以及该基因在肝癌细胞转移中的作用.方法:Trizol试剂法提取体外培养的人肝癌高转移细胞株MHCC97总RNA,经逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)扩增目的片段,PCR产物及真核表达载体分别双酶切后进行连接,并转化入大肠杆菌Ecoli.Dh5α扩增以获得重组质粒.重组质粒、空质粒分别转染入人高转移肝癌细胞株,进行扩增培养,分别绘制MHCC97/vect-cortactin(+)、MHCC97/vect和MHCC97细胞生长曲线;并进行Western-blot实验及通过小室培养模型进行细胞侵袭力实验.结果:RT-PCR获得预期大小的特异性DNA片段,经PCR、双酶切鉴定及测序证实人皮层肌动蛋白基因cDNA片段已正确的反向插入真核表达载体中.细胞生长曲线提示转染与未转染该基因的肝癌细胞生长曲线相同;Western-blot结果显示转染反义基因的肝癌细胞皮层肌动蛋白cortactin呈低表达或不表达;细胞侵袭力实验表明转染有反义基因的肝癌细胞穿膜细胞数较未转染的有非常显著差异(P＜0.01).结论:从蛋白水平和细胞水平均证实该反义基因能抑制肝癌细胞的皮层肌动蛋白的表达和游走而不影响细胞的生长特性.
其他文献
患者 女 ,46岁 ,因子宫肌瘤入院。术前胸部正位片示纵隔左缘肿块影。为进一步了解肿块性质 ,遂行胸部ＣＴ扫描。胸部Ｘ线平片 :纵隔影向左侧明显增宽 ,呈分叶状 ,边缘较清 ,中等密
ＣＴ扫描是诊断外伤性颅内血肿的主要检查方法。对颅内血肿的位置、大小、形态、范围都能提供明确的诊断。而根据ＣＴ图像中血肿的大小计算出血肿量是外科手术的重要指标。常用的计算
该文从挂篮荷载计算、施工流程、支座及临时固结施工、挂篮安装及试验、合拢段施工、模板制作安装、钢筋安装、混凝土的浇筑及养生、测量监控等方面人手,介绍了S226海滨大桥
Leing structure from data is one of the most important fundamental tasks of Bayesian network research. Particularly, leing optional structure of Bayesian networ
骨盆是许多溶骨性疾病的好发部位。在普通平片上 ,肠内容物伪影常与病灶重叠 ,干扰观察 ,一旦摄片条件欠佳 ,诊断更为困难。ＣＴ扫描检查在这方面可以起到良好的补充。下面就我们
该文从挂篮荷载计算、施工流程、支座及临时固结施工、挂篮安装及试验、合拢段施工、模板制作安装、钢筋安装、混凝土的浇筑及养生、测量监控等方面人手,介绍了S226海滨大桥
一是强化宣传力度。在新农村建设示范村、国省干道沿线村屯和乡镇政府所在地分别悬挂或粉刷了新农村宣传标语。省级示范村在村头醒目位置树立了标识牌，制作了宣传栏，加大秋季环
三房心为一种少见的先天性心脏病,约占总数的0.1%～0.4%[5].本病临床诊断困难,易和二尖瓣病变相混淆.现将我院经手术证实的3例报告如下. 例1 男,24岁,因反复发作心慌,气喘20余