布鲁氏菌和鹦鹉热衣原体双重PCR检测方法的建立与应用

• 作 者: 彭武丽 罗展荣 史茜 员丽娟 于学辉 季新成
• 机 构: 石河子大学生命科学学院,新疆出入境检验检疫局,中国人民解放军69016部队
• 出 处: 中国畜牧兽医
• 发表日期: 2014年4期
• 关键词: 布鲁氏菌 鹦鹉热衣原体 双重PCR 共扩增
• 基金项目: 国家质量监督检验检疫总局科研项目(2014IK239、2011IK017);质检公益专项(20111024)

为建立同时检测布鲁氏菌和鹦鹉热衣原体的双重PCR方法，本研究据GenBank上已发表的具有属间特异性的布鲁氏菌bp26基因和鹦鹉热衣原体23SrRNA基因，利用PrimerPremier5．0软件各设计l对特异性引物，扩增的目的片段长度分别为219和356bp。通过优化反应条件，建立了能同时检测布鲁氏菌和鹦鹉热衣原体的双重PCR方法。该方法具有较好的特异性和可重复性，对2种基因单重PCR检测敏感性均达到3．1×10^2拷贝／反应，双重检测的灵敏度为3．1×10^3拷贝／反应。利用该双重