最早传入北京地区的SARS冠状病毒S基因序列分析和克隆

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SARS冠状病毒的spike (S)蛋白对病毒的致病力至关重要,也是机体特异性体液和细胞免疫主要针对的靶分子.从北京地区最早发现的SARS患者咽拭子细胞培养上清中提取病毒RNA,用反转录巢式聚合酶链式反应(RT-PCR)分6个片段扩增出S基因全序列,用TA载体克隆后进行DNA序列分析,再通过重叠PCR将6个片段连接成一条完整的S基因并克隆测序.DNA测序结果表明病毒S基因序列与报告的BJ01株SARS冠状病毒S基因序列完全一致,用重叠PCR将6个S基因片段连接成了一条完整的S基因,插入到pGEM-T载体后
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