PTD-BCR/ABL-OD融合癌蛋白的表达和跨膜转运

• 作 者: 梁英民 叶盛开 贾洪霞 林媛 蒋姗姗 吴绒丽 周鹏 杨曦 张萍 李军锋 李军林 韩骅
• 机 构: 710038,西安,第四军医大学唐都医院血液科,710038,西安,第四军医大学唐都医院血液科,710038,西安,第四军医大学唐都医院血液科,第四军医大学口腔医学院牙体病科,710038,西安,第四
• 出 处: 中华血液学杂志
• 发表日期: 2005年26期
• 关键词: 跨膜转运 癌蛋白 融合蛋白 结构域 羊抗兔荧光抗体 抗组氨酸抗体 伊马替尼 血液学缓解 原核表达载体 诱导剂

寡聚化结构域(oligomerization domain,OD)是BCR/ABL融合蛋白N端的一个重要结构域,是2个单体通过N末端螺旋易位,然后在C末端螺旋间形成反向卷曲折叠形成二聚体,进而互相叠套形成四聚体.在几种不同类型的Ph染色体阳性的慢性粒细胞白血病(CML)患者中可以观察到这种四聚体的形成,它能介导BCR/ABL融合蛋白多聚体的形成,进而使无活性的ABL蛋白的酪氨酸激酶活化[1,2].因此,如果能够利用外源性的OD结构域蛋白干预内源性蛋白的聚合,从而达到抑制BCR/ABL蛋白激酶活化的作用.我们在以前工作的基础上,采用PCR扩增OD区基因片段,并在其N端融合蛋白转导结构域(PTD)基因后,构建原核表达载体,然后在大肠杆菌中进行表达.纯化表达的融合蛋白,并加入到培养的K562细胞中,对OD结构域蛋白在细胞中的作用进行了初步探讨。