电脉冲作用将外源基因导入稀有鮈鲫精子的研究

• 作 者: 钟家玉 茅卫锋 等
• 机 构: 中国科学院水生生物研究所淡水生态与生物技术国家重点实验室
• 出 处: 遗传学报
• 发表日期: 2002年2期
• 关键词: 稀有ju鲫 电脉冲-精子介导转基因法 外源基因导入 转基因鱼 rare minnow electroporatedspermmediated gene tra
• 基金项目: 《国家重点基础研究发展规划》项目G2 0 0 0 0 1610 9资助

将稀有ju鲫（Gobiocypris rarus）精子与重组质粒pGAhLFc线性DNA混合温育，经电脉冲处理后与卵子受精，孵化出苗。从鱼苗中提取DNA，经PCR检测，25.5%～66.7%鱼苗带有外源基因。在显微镜下观察经电脉冲处理过的精子，发现其活力有不同程度下降，受精率也有不同程度下降，说明不同的电脉冲条件对精子有不同程度的损害作用。精子与外源DNA混合温育，经电脉冲处理后，用DNA外切酶消化后，提取精子DNA，经PCR检测，仍有阳性电泳带，证明电脉冲可以促使稀有ju鲫精子摄入外源基因。