免疫胶体金技术在诊断犬瘟热中的应用

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  摘要:犬瘟热是犬属动物多发性、致死性的重大传染病之一。文章对前来就诊的15例疑似犬瘟热的病料除进行免疫胶体金检测外,平行进行镜检、荧光抗体检测和PCR检测,免疫胶体金检测和PCR检测结果15例均为犬瘟热阳性。
  关键词:犬瘟热病毒;免疫胶体金;诊断
  中图分类号:S85 文献标识码:A 文章编号:1674-0432(2011)-11-0197-1
  犬瘟热(Canine Distemper, CD)是由犬瘟热病毒(Canine Distemper Virus, CDV)引起的犬科、鼬鼠科及部分浣熊科的一种急性、高度接触性传染病,主要侵害消化系统、呼吸系统,有时也侵害神经系统,临床上以上呼吸道、胃肠道的卡他性炎症,非化脓性脑膜脊髓炎和双相热型为主要特征。Carrie首次报道CD病原为病毒,该病几乎遍布世界各地,被视为当前危害犬群最严重的疫病之一。我国是CD的多发地区,在全国各地均有发生,流行范围极广,发病率和死亡率均较高,对养犬业危害巨大。CDV属于副粘病毒科,麻疹病毒属成员,基因组为单股RNA,病毒粒子呈现圆形或不整形成。虽然CDV病原体只有一个血清型,但病型却复杂多样,临床上常与支气管败血波特杆菌、沙门氏菌、犬细小病毒、传染性肝炎病毒等病原混合感染或继发感染,所以给诊断带来了巨大困难。本文根据病例的临床症状、病理剖检和流行病学调查资料做出初步诊断的基础上,经血清学方法——免疫胶体金试纸条做出最终诊断。
  1 病例
  来自吉林省延边朝鲜族自图们市15例病例,病犬均死亡。采集病犬抗凝血,分离血清,同时采集各病变明显的组织,-20℃保存备用。
  2 临床症状
  病犬初期表现为体温升高,有时高达40℃以上,尿赤黄或更深,眼睛有脓性分泌物,精神颓废,食欲废绝。随后侵害波及呼吸系统,病犬表现为体温持续升高,鼻部干燥或龟裂,眼鼻脓性分泌物增多,常出现咳嗽,呼吸困难,肺部有罗音特征。因此发病初、中期,很容易被错误诊断为感冒或肺炎,应该予以其他方法进行鉴别。个别病犬出现呕吐和腹泻。病程后期常出现神经症状,如出现吠叫、头部震颤、四肢抽搐,严重时出现癫痫症状,最终因麻痹衰竭死亡而转归,病犬脚垫增厚、干裂也是后期的典型特征。如果进入后期,出现神经症状就很难治愈,即便是病愈,也会留下后严重的遗症。一般情况下病犬的病程为15-45d,出现神经症状的病犬均以死亡告终。
  3 病理变化
  由于CDV对犬的上皮细胞具有特殊亲和力,所以病变分部比较广泛。幼龄犬感染CDV后通常出现胸腺萎缩,而成年犬则多见结膜炎、鼻炎、气管及支气管炎和卡他性肠炎。进入后期的病犬如出现神经症状,则病犬的脚垫部皮肤多发生角质化或龟裂,中枢神经系统病变较为明显,如脑室扩张和脑膜内充血,以及脑脊髓液大量增加。病犬的神经组织内可见嗜酸性包涵体,多出现在细胞浆内,直径为1-5μm,而核内包涵体多位于神经节细胞、腺上皮细胞和上皮细胞。
  4 诊断结果
  为确保诊断的准确性,在诊断过程中采取了包涵体检查、荧光抗体检测和PCR检测等三种平行诊断。对15份疑似CD的病料进行镜检、血清学诊断和分子生物学诊断。其中免疫胶体金检测与PCR检测结果均为CD阳性,而荧光抗体检测CD阳性13例,包涵体检测CD阳性9例(表1)。
  5 讨论
  犬瘟热是犬类多发的一种常见病,对养犬业的危害非常之大,也是阻碍养犬业发展的重大传染病之一。这就要求养殖户要特别重视犬瘟热的发生和发展,一旦发生犬瘟热,为阻止病原体的蔓延,管理人员必须迅速将病犬从畜舍内隔离出来,用来苏儿或火碱等消毒试剂对率舍进行彻底消毒,避免病犬的调动和外来人员进入,对周边假定健康犬和受疫情威胁犬,可用犬瘟热病毒高免血清或单克隆抗体进行紧急接种,等疫情逐渐稳定后,再考虑注射犬瘟热疫苗。
  患犬瘟热的耐过犬能获得坚强的免疫力。因此,按照犬的免疫规程进行合理的免疫接种,是预防本传染病的最好手段。目前,国内多采用犬六联弱毒疫苗和犬五联弱毒疫苗进行免疫接种。近些年,通过这些疫苗的应用,对我国军犬、警犬、宠物犬和实验用犬的病毒性疾病起了积极的预防作用。但由于是弱毒疫苗,存在散毒的可能,也给临床诊断带来了障碍。为了使诊断准确,避免单一检测手段的不准确性,临床上我们要采用包括血清学和分子生物学在内的多种检测方法联系应用,才能使诊断更加准确和确实。
  
  
  参考文献
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  作者简介:王学富(1965-),男,吉林图们人,图们市石岘镇畜牧兽医站站长。
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