【摘 要】
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目的:构建针对乙型肝炎病毒(HBV)C区基因(2029-31及2063-65位点)的双位点核酶的真核表达载体,观察其在细胞内对HBV基因表达的抑制作用.方法:利用亚克隆技术,从质粒pGEMRz123
【机 构】
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第四军医大学唐都医院传染科,陕西,西安,710038
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目的:构建针对乙型肝炎病毒(HBV)C区基因(2029-31及2063-65位点)的双位点核酶的真核表达载体,观察其在细胞内对HBV基因表达的抑制作用.方法:利用亚克隆技术,从质粒pGEMRz123切下EcoR I-BamH I片段, 双粘端克隆于真核质粒pBBS212中,将该质粒与p1.2Ⅱ(含HBV全序列)共转染HHCC细胞(人肝癌细胞株),观察该核酶对HBV基因表达的抑制作用.结果:在HHCC细胞中p1.2Ⅱ可表达出HBsAg及HBeAg.该核酶对HBeAg的合成抑制率达65%.结论:该双位点核酶可能通过针对HBV C区mRNA的剪切作用,阻断C区mRNA的表达,抑制了HBeAg的合成.
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