【摘 要】
：
干扰素α2b(interferonα2b,IFNα2b)是一种用于病毒性疾病和肿瘤性疾病治疗的多功能细胞因子,因其在体内的半衰期短限制了其在临床上的应用。将IFNα2b连接到人血清白蛋白(h
【机 构】
：
江南大学药学院,温州大学生命与环境科学学院,苏州大学唐仲英血液学研究中心,苏州大学附属第一医院,
论文部分内容阅读
干扰素α2b(interferonα2b,IFNα2b)是一种用于病毒性疾病和肿瘤性疾病治疗的多功能细胞因子,因其在体内的半衰期短限制了其在临床上的应用。将IFNα2b连接到人血清白蛋白(human serum albumin,HSA)的C端,构建融合蛋白HSA-IFNα2b。构建含融合蛋白的真核表达质粒p MH3/HSA-IFNa2b,经电转的方法转入中国仓鼠卵巢(Chinese hamster ovary,CHO)细胞中。经G418抗性压力筛选和目的蛋白的表达量筛选,最终获得一株高表达的稳定细胞株(CHO/p MH3/HSA-IFNa2b)。表达的目的蛋白经Western blot验证显示,产物具有IFNα2b和HSA的双抗原性。经悬浮驯化稳定后,通过批次筛选得到一株稳定的高克隆表达株,产量约为65mg/L,进一步选取高表达克隆株在悬浮驯化中不同代数进行批次培养,不同代数之间蛋白质的表达量和生长情况没有明显的差异,获得一株稳定遗传表达的单克隆细胞株,3L摇瓶的流加培养结果显示,最佳发酵时间为15天,蛋白质表达量为121mg/L。经离心获得的发酵液,经两步纯化后获得蛋白质纯度高达96.8%的目的蛋白,总回收率为22.3%。参照《中国药典》2015版对IFNα2b的检测方法,结果显示,CHO表达的HSA-IFNα2b比活性为4.16×106IU/mg。首次将HSA-IFNα2b在哺乳动物细胞CHO中构建表达,表达获得高活性的HSA-IFNα2b融合蛋白。
其他文献
大学生创新创业教育不仅提升大学生素质教育的重要构成部分,更是适应新的经济形势、拓宽学生就业和发展的渠道和构建国家创新体系的长远大计。
水稻是重要的粮食作物之一。本研究以骨干系93-11为受体亲本,以广陆矮4号为基因供体,构建了染色体片段代换系(Chromosome Segment Substitution Lines,CSSL)。在鉴定染色体代
诗词曲赋是我国韵文创作的四大样式,辞赋作为中国古代优秀文学的重要组成部分,不仅历史悠长、数量繁多而且题材广阔,可以说具有丰富的审美教育价值。因此进行古代辞赋类文本教学,不仅能帮助学生逐步形成高尚的审美情趣和审美能力,更有助于传承中华民族优秀的传统文化,为学生的未来发展奠定坚实的基础。现阶段,各版语文教材均精选了优秀的辞赋作品,学习这些优秀作品对于中学生学习辞赋的语言风格、艺术手法和培养严谨的逻辑思
建筑行业作为国家经济发展的命脉,经济全球化的影响要求建筑业必须做出调整,国家可持续发展的战略要求与现代建筑业中物资设备的多样化采购,对建筑业采购计划、物资配送及现
本课题根据神府东胜矿区的开采技术条件和实际情况，从基础性研究、工艺系统、采煤方法和短壁机械化关键设备等方面，系统地研究了连续采煤机房柱式短壁机械化开采技术。以“梁”
军民融合的发展早已上升到国家的战略层面,而目前军工企业在军民融合方面的发展还是处于起步阶段,由于军工企业的产销参与市场竞争较少,市场营销的思路不会在军工企业中体现,
企业政工工作有助于提升企业的软实力,文章基于企业政工工作的重要作用,分析新时代下企业政工工作开展面临的挑战,提出了新时代下企业政工工作的创新发展路径,以供参考。
教育社会学认为,班级是一个微型社会,是学生学习和生活的重要场所,班集体的发展目标不仅是教育学生打好文化基础,更重要的是要培育学生的责任担当、创新意识、人际交往等方面
近年来,随着我国经济的不断发展,国家提出了新的战略和方针"中国制造2025",这个理念强调以绿色发展为前提,同时还提出创新发展等理念。人们生活水平的提高,使得汽车成为人们
回 回 产卜爹仇贱回——回 日E回。”。回祖 一回“。回干 肉果幻中 N_。NH lP7-ewwe--一”＄ MN。W;- __._——————》 砧叫]们羽 制作:陈恬’＃陈川个美食
Back to yield