【摘 要】
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目的:从慢性乙型肝炎恩替卡韦临床耐药的患者血清中,应用高保真聚合酶长距离扩增、克隆乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)全基因组序列,建立HBV 恩替卡韦耐药株的全长基因
【机 构】
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江苏省如东县中医院检验科,南通市第三人民医院检验科
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目的:从慢性乙型肝炎恩替卡韦临床耐药的患者血清中,应用高保真聚合酶长距离扩增、克隆乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)全基因组序列,建立HBV 恩替卡韦耐药株的全长基因克隆.方法:从3 例恩替卡韦临床耐药的慢性乙型肝炎患者血清中提取HBV DNA,应用高保真聚合酶对3 200 bp 的HBV DNA 进行全序列扩增,通过克隆技术构建PGEM-HBV 重组质粒,DNA 测序后进行序列分析.结果:获得1 株恩替卡韦基因耐药的HBV DNA 全长序列克隆,序列长度为3 216 bp,序列分析发现在逆转录区有L180M、M204V、T184G 位点变异.结论:构建了恩替卡韦基因耐药的HBV DNA 全长序列克隆,为进一步研究HBV 耐药株提供工具.
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