【摘 要】
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使用硫酸铵分级沉淀、Sephadex G-25凝胶色谱脱盐和Sephadex G-100凝胶色谱等分离纯化技术,从康氏木霉(Trichoderma Koningii)发酵液中分离出木聚糖酶,纯化后的木聚糖酶经十
【基金项目】
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广东省科技攻关项目(2004B10201001);广东省科技计划项目(2004B20401001,2003B31701);广州市科技攻关项目(2002Z3-E0321)
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使用硫酸铵分级沉淀、Sephadex G-25凝胶色谱脱盐和Sephadex G-100凝胶色谱等分离纯化技术,从康氏木霉(Trichoderma Koningii)发酵液中分离出木聚糖酶,纯化后的木聚糖酶经十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺(SDS-PAGE)凝胶电泳鉴定为单一组分,其相对分子质量为55 208.所得的木聚糖酶的最适反应温度为65℃,pH值为6.0.该酶稳定性较好,在30~60℃下放置2 h能保持83%以上的酶活;在3.0~10.0的pH值范围内能保持85%以上的酶活.研究表明:金属离子Ba2+,Pb2+,Fe2+,Fe3+,A l3+和高浓度(12mmol/L)的Cu2+对木聚糖酶的活性有抑制作用,而Ca2+,Zn2+和4mmol/L的Cu2+对该酶反应有促进作用.该木聚糖酶作用于B irchwood木聚糖的米氏常数为5.37 g/L,最大反应速率为0.94μmol/m in.
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