【摘 要】
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本研究旨在进行山羊成熟白细胞介素-4的体外表达及重组蛋白生物学活性分析。运用PCR技术以pMD18-T-pGIL-4（pGIL-4为山羊IL-4全序列基因）为模板扩增成熟蛋白（mIL-4）基因,并构建pET
【机 构】
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南京农业大学动物医学院,山西运城农业职业技术学院
【基金项目】
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国家“863”项目（2011AA10A211）,江苏高校优势学科建设工程资助项目
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本研究旨在进行山羊成熟白细胞介素-4的体外表达及重组蛋白生物学活性分析。运用PCR技术以pMD18-T-pGIL-4（pGIL-4为山羊IL-4全序列基因）为模板扩增成熟蛋白（mIL-4）基因,并构建pET-32a（＋）-mGIL-4原核表达载体,IPTG诱导目的蛋白表达。使用改进的方法纯化目的蛋白后,采用淋巴细胞转化试验检测重组蛋白对山羊外周血T淋巴母细胞的增殖活性。经测序,mIL-4含339个核苷酸,编码112个氨基酸。表达的重组蛋白约为31.3ku,主要以包涵体形式表达。通过改进纯化方法获得了高纯度
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