幽门螺杆菌临床菌株2148bp的cagA基因片段克隆、表达及免疫性鉴定

• 作 者: 邵世和 王媛 严杰
• 机 构: 北华大学医学院医学检验系,浙江大学医学院病原生物学教研室
• 出 处: 中国人兽共患病杂志
• 发表日期: 2004年7期
• 关键词: 幽门螺杆菌 cagA基因 克隆 表达 免疫原性

目的克隆幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)临床菌株的cagA基因片段,构建原核表达系统,鉴定重组表达产物的免疫原性.方法由于cagA基因核苷酸序列变异较大,选择序列相对稳定的2148bp为目的片段(cagA1).采用高保真PCR扩增幽门螺杆菌临床分离菌株Y06中的目的片段cagA1,T-A克隆后测序.构建pET32a的cagA1片段表达载体,在E.coli BL21DE3宿主菌中用不同浓度的IPTG诱导表达.采用Ni-NTA亲和层析法收集表达的目的重组蛋白(rCagA1).采用Hp