论文部分内容阅读
目的:应用小鼠结直肠癌半脾切除肝转移模型研究Hippo信号通路的作用。方法:20只BALB/c小鼠随机分为假手术组和实验组。假手术组将小鼠开腹后关腹,实验组将小鼠结肠腺癌CT26细胞注入脾的下极后切除,建立肝转移模型。7 d后小鼠处死并解剖。ELISA法检测小鼠眼球血中肾上腺素(epinephrine,EPI)、胰高血糖素(glucagon,GC)、溶血磷脂酸(lysobisphosphatidic acids,LPA)和1-磷酸鞘氨醇(sphingosine-1 phosphate,S1P)的含量;HE染色结果确定脾半切除肝移植瘤造模成功,免疫组织化学法对Yes相关蛋白1(yes-associated protein 1,YAP1)和磷酸化YAP1(phospho-yes-associated protein 1,p-YAP1)进行定位,蛋白质印迹法检测肝组织中YAP1和p-YAP1的表达水平。结果:小鼠结直肠癌半脾切除模型建立7 d后肝转移率为100%;假手术组血浆中EPI与GC的含量均明显高于实验组(P值均<0.01),实验组小鼠血浆中LPA与S1P的含量均明显高于假手术组(P值均<0.01);实验组肝组织HE染色结果显示典型的低分化腺癌特征,有核分裂现象。假手术组正常肝组织中YAP1蛋白表达在细胞质中[细胞核YAP1(-),细胞质YAP1(+)],p-YAP1蛋白在细胞质和细胞核中均有表达[细胞核p-YAP1(+),细胞质p-YAP1(+)];实验组肝肿瘤组织中YAP1蛋白在细胞质和细胞核中均有表达[细胞核p-YAP1(+),细胞质p-YAP1(+)],p-YAP1蛋白在细胞核与细胞质中均未见表达[细胞核p-YAP1(-),细胞质p-YAP1(-)]。YAP1在实验组肝肿瘤组织中的表达水平明显高于假手术组(P <0.01),p-YAP1在实验组肝肿瘤组织中的表达水平明显低于假手术组(P <0.01)。结论:成功建立结直肠癌肝转移模型,并发现EPI、GC与YAP1表达呈负相关,与p-YAP1表达呈正相关,LPA、S1P与YAP1呈正相关,与p-YAP1呈负相关。有望开发针对Hippo信号通路相关血清因子调节剂,进行靶向治疗研究。