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目的 建立实用可行的食品微生物检测试剂盒的评价方法.方法 本研究以ISO 16 140为理论基础、GB 4789.10-2010为参比方法,从检测特异性、灵敏度、耐变性/统计学分析等方面对3M公司Petrifilm大肠埃希氏菌检测试剂盒(PEC)进行了可替代性评价.结果 PEC法对目标菌检测的特异性为84％,对非目标菌检测的特异性为100％;灵敏度检测中在25份低浓度添加样品里,PEC法的灵敏度有22份可以达到10 CFU/g,3份火腿样品的结果为阴性,国标法所有样品灵敏度均可达到10 CFU/g;耐变性评价中,PEC法在35 C/37℃、18 h/24 h耐变性条件的比较中检测结果差异均无统计学意义(P＞0.05);应用2种方法对添加高、中、低3个水平的大肠埃希菌的五大类样品进行测试,线性方程为y =0.942 1x +0.328 4,相关系数为0.798 9,5类样品不同方法测试结果差异均无统计学意义(P＞0.05);应用2种方法对30份自然样品进行检测,PEC法检测出4份阳性样品,国标法检测出6份阳性样品,2种方法阳性符合率为93.33％,差异无统计学意义(P＞0.05).结论 以ISO 16140为理论基础可建立一套评价方法,此方法可系统的对微生物检测用试剂盒的可替代性进行评价.