Real—time TaqMan RT—PCR快速检测犬瘟热病毒方法的研究

• 作 者: 王君玮 孙承英 姜平 王志亮 张维 李林 赵永刚 王珊 任炜
• 机 构: 南京农业大学动物医学院,中国动物卫生与流行病学中心
• 出 处: 现代生物医学进展
• 发表日期: 2007年2期
• 关键词: 犬瘟热病毒 荧光定量RT—PCR Real—time PCR 检测 Canine distemper virus Fluorescent quantitatio
• 基金项目: 青岛市科技发展计划项目,项目编号：05-2-JC-78.致谢：衷心感谢青岛恒康生物科技有限公司张莉女士、徐伟、李开福、钟永彬在样品采集处理方面提供帮助.

按照犬瘟热（CDV）N基因序列，设计合成了特异性引物和探针，经各反应条件的优化，建立了Real—time荧光定量RT—PCR技术，对细胞培养物、肝脏、肺脏、脑、脾脏、淋巴结以及鼻腔拭子等组织病料中的CDV进行了特异性检测和敏感性试验。同时，利用建立的Real—time荧光定量RT—PCR方法与常规RT—PCR以及韩国BIOINDIST生产的BITRAPIDCDV检测试剂盒对57份临床样品进行了检测。结果：用20pmol／mL的引物浓度各luL和20pmol／mL的探针浓度0.3uL，获得的荧光信号最强，曲