人精子顶体膜相关蛋白32真核表达载体的构建及其在NIH3T3细胞中的表达

• 作 者: 臧卫东 陈雪梅 任秀花 赵青赞 曹静 郝莉
• 机 构: 郑州大学基础医学院人体解剖学教研室
• 出 处: 郑州大学学报：医学版
• 发表日期: 2006年4期
• 关键词: 精子膜抗原 脂质体 细胞转染 原位杂交 sperm membrane antigen liposome cell transfection in-situ
• 基金项目: 河南省自然科学基金资助项目511030300

目的：研究人精子顶体膜相关蛋白32（hSAMP32）mRNA在体外细胞NIH3T3中的表达。方法：利用RT—PCR及亚克隆技术构建pcDNA3．1（＋）-hSAMP32质粒，实验组以脂质体介导基因转染法将pcDNA3．1（＋）-hSAMP32真核表达载体导入NIH3T3细胞中，同时设置空白和阴性对照组（转染空载体pcDNA3．1（＋））。原位杂交检测hSAMP32mRNA在3组细胞中的表达。结果：①RT—PCR扩增产物与预期的目的基因hSAMP32长度一致。亚克隆酶切鉴定可见目的片段。②实验组阳性细胞胞浆