Fat-1基因载体构建及其在家鸡中的体外表达

• 作 者: 王颖 顾真真 郭若婷 欧科鹏 刘乙 刘小军
• 机 构: 石河子大学动物科技学院,河南农业大学牧医工程学院
• 出 处: 中国畜牧兽医
• 发表日期: 2016年4期
• 关键词: ω-3脂肪酸脱氢酶 载体构建 成纤维细胞 基因表达 转基因 ω-3 fatty acid desaturase vector construction fi
• 基金项目: 石河子大学校级育种专项（gxjs2012-yz06）

试验旨在构建一种适合于家禽体外表达的ω-3脂肪酸脱氢酶Fat-1基因的真核生物表达载体,为后续转基因鸡的生产奠定基础。根据家鸡密码子使用频率,对秀丽隐杆线虫Fat-1基因进行优化改造;将改造后的Fat-1基因（cFat-1）连接至pLL3.7表达载体,构建重组质粒pLL3.7-cFat-1;经PCR、酶切、序列分析等手段对重组质粒进行鉴定;用胰酶消化法培养鸡成纤维细胞,利用TurboFect TM转染试剂将pLL3.7-cFat-1转染体外培养的成纤维细胞;通过RT-PCR检测和绿色荧光观察分析cFat-