牛分枝杆菌单基因及双价融合基因DNA疫苗免疫效果的研究

• 作 者: 宫强 刘思国 王春来 王勇 刘建东 迟磊 赵昆 周媛媛 常月
• 机 构: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室动物细菌病研究室
• 出 处: 中国生物工程杂志
• 发表日期: 2007年2期
• 关键词: 牛分枝杆菌 单基因 融合基因 DNA疫苗 Mycobacterium bovis Single gene Fusion gene DNA vaccine
• 基金项目: 国家科技攻关计划“奶牛主要疫病防治关键技术研究与产业化开发课题”资助项目（2002BAS18A04）

利用PCR技术和SOE技术扩增牛分枝杆菌ag85b、esat-6、hsp65、mpb64基因和ag85b-esat-6、hsp65-esat-6和mpb64-esat-6融合基因，连接真核表达载体pCDNA3．1（＋），构建重组质粒pCA、pCE6、pCH、pCM、pCAE、pCHE和pCME。转染SP2／0细胞，检测目的基因的表达。以各重组质粒和pCDNA3．1（＋）及PBS免疫BALB／c小鼠后检测血清特异性抗体水平、脾淋巴细胞增殖情况和IFN-γ分泌情况。结果表明，7种重组质粒免疫后小鼠血清抗体水平