甲基营养菌Methylobacterium extorquens AM1中最适荧光蛋白报告基因的鉴定

• 作 者: 朱丽萍 刘聪聪 宋书真 刁斌
• 机 构: 青岛农业大学生命科学学院山东省应用真菌重点实验室
• 出 处: 生物技术通报
• 发表日期: 2019年4期
• 关键词: 甲基营养菌 荧光报告基因 相对荧光强度 Methylobacterium extorquens fluorescence reporter gene relat
• 基金项目: 国家自然科学基金项目(31600028),青岛市应用基础研究计划(16-5-1-76-jch).

近年来荧光蛋白成为基因工程中常用的遗传标记,详尽解读不同荧光蛋白基因在甲基营养菌中的表达可以鉴定最适的荧光报告基因。克隆了常用的绿色荧光蛋白eGFP、红色荧光蛋白mCherry、黄色荧光蛋白YFP以及其他来源的绿色荧光蛋白wGFP和红色荧光蛋白RFP共5种荧光基因,构建相应的表达载体并在甲基营养菌Methylobacterium extorquens AM1中进行表达。通过荧光成像观察和SDS-PAGE蛋白凝胶电泳进行荧光蛋白表达鉴定。通过细菌生长曲线、荧光总量和相对荧光强度的测定,进行荧光稳定性和表达强