趋化因子配体18重组成熟肽段的表达

• 作 者: 杨莹珠 王琪 周怡 张玮 黎丹戎 詹步坚 李力
• 机 构: 广西医科大学肿瘤医院妇瘤科
• 出 处: 医学分子生物学杂志
• 发表日期: 2009年3期
• 关键词: 趋化因子配体18 卵巢癌 原核表达 蛋白纯化 chemokine ligand 18 ovarian neoplasm prokaryotic expre
• 基金项目: 国家自然科学基金（No.30560157）,广西省自然科学基金（No.桂科自0832230）,广西研究生教育创新计划资助项目（N0.2008105981002M217）

目的构建PET SUMO-CCL18原核表达质粒，并表达、纯化获得重组趋化因子配体18成熟肽段。方法从人卵巢癌组织中克隆CCL18基因全长，继而扩增表达成熟蛋白质的核酸序列，连接人PETSUMO载体，重组阳性克隆转入感受态细胞BL21（DE3）中IPTG诱导表达，基质辅助激光解吸／电离质谱技术（MALDI-TOF）验证后以SUMO蛋白酶切除载体部分，纯化浓缩，MALDI-TOF鉴定表达结果。结果测序分析证实，克隆人PETSUMO载体的CCL18序列与Genbank中报道序列完全一致，纯化后蛋白质谱鉴定与天