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目的 通过计算机程序模拟组织型谷氨酰胺转移酶(tissue transglutaminase,tTG)基因的mRNA二级结构,优化硫代反义寡核苷酸(antisense oligodeoxynucleotide.ASODN)药物设计,为有效抑制小梁细胞表达tTG提供新的途径.方法根据牛tTG mPNA的二级结构,选择环与茎结合区(280～300bp)和茎区(2720～2740bp)作为反义药物作用的靶点,分别合成ASODN1、ASODN2,用脂质体包埋后转染牛眼小梁细胞.通过半定量RT-PCR法检测转染后tTGmRNA表达的变化来评价tTG-ASODN的生物学效应.结果ASODN1、ASODN2对tTG mRNA的表达均有抑制作用,与空白对照组相比差异有显著性(P＜0.05),且tTG-ASODN1抑制作用明显强于tTG-ASODN2(P＜0.05). 结论 选择环与茎连接的部位作为反义作用的靶点,其反义作用明显强于茎区.从机制上讲,可能是因为环与茎连接的部位的形成需要吸收能量,是整个tTGmRNA序列中最不稳定的区域,ASODN容易接近而发挥作用,提示通过tTG mRNA二级结构的模拟而选择ASODN是设计反义药物的新途径。