【摘 要】
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目的 :利用自己构建的酿酒酵母全基因组DNA芯片 ,分析盐酸小檗碱处理酵母细胞后对其整个基因表达谱的影响 ,在基因水平上分析盐酸小檗碱的药理机制。方法 :用盐酸小檗碱 (10
【机 构】
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清华大学生物技术与科学系,生物芯片北京国家工程研究中心,北京大学天然药物及仿生药物国家重点实验室
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目的 :利用自己构建的酿酒酵母全基因组DNA芯片 ,分析盐酸小檗碱处理酵母细胞后对其整个基因表达谱的影响 ,在基因水平上分析盐酸小檗碱的药理机制。方法 :用盐酸小檗碱 (10 0 μg/ml)处理酵母细胞 90min后 ,抽提细胞的RNA进行反转录荧光标记cDNA ,与DNA芯片进行杂交。用激光扫描仪检测杂交信号。结果 :共有 5 45个基因〔占全部基因 (6 183个 )的 9%〕受到诱导 ,38个基因 (占全部基因的 0 6 % )受到抑制。被诱导的基因包括与细胞生长、蛋白质合成及应激反应相关的基因。受抑制的基因包括与氧化磷酸化过程相关的基因和好氧基因。与金属离子平衡 ,特别是与铁离子和铜离子平衡有关的基因表达有较大变化。结论 :处理 90min后 ,酵母细胞在转录水平上表现出对盐酸小檗碱处理的适应性。盐酸小檗碱的药理作用可能和引起细胞内的氧浓度变化及氧化还原反应产生的自由基有关。细胞容易对盐酸小檗碱产生抗药性的原因是由于与细胞抗药性相关的基因受到了明显的诱导。
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