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目的
初步探讨自噬在气管狭窄家兔模型中的表达及意义。
方法18只家兔根据随机数字表法均分成空白对照组、生理盐水组、红霉素组3组。建立家兔气管狭窄模型后,术前7 d至术后10 d期间,空白对照组不予任何处理,生理盐水组予以生理盐水0.54 mg/kg雾化,红霉素组予以红霉素7.5 mg/kg喂食,均为2次/d。术后第11天处死家兔,收集气管标本。利用Masson染色检测气管黏膜层及固有层中胶原纤维面积比例;运用实时荧光定量PCR检测气管黏膜中自噬相关基因3(ATG3)、自噬相关基因5(ATG5)的mRNA相对表达量;运用Western印迹法检测微管相关蛋白1轻链β3(MAP1-LC3B,简称LC3B)、ATG3、ATG5蛋白的表达量。
结果空白对照组、生理盐水组、红霉素组气管黏膜层及固有层中胶原纤维面积所占比例分别为(6.79±0.67)%、(40.55±5.40)%、(27.48±0.43)%,组间差异均有统计学意义(均P<0.05)。生理盐水组ATG3 mRNA和ATG5 mRNA的相对表达量均显著低于空白对照组(均P<0.01),红霉素组均显著高于生理盐水组(均P<0.01)。生理盐水组LC3B-Ⅱ/Ⅰ蛋白比值、ATG3和ATG5蛋白表达水平均显著低于空白对照组(均P<0.01),红霉素组蛋白表达水平均显著高于生理盐水组(均P<0.01)。
结论气管狭窄家兔自噬表达水平降低,小剂量红霉素可提高其表达,同时减轻气管黏膜纤维化程度;自噬可能通过上调其表达,从而改善气管纤维化。