【摘 要】
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目的 探讨移植脂肪干细胞(ADMSC)对球囊损伤后大鼠颈动脉新生内膜异常增殖的影响及机制.方法 45只雄性SD大鼠,随机分为3组:对照组(假手术,n=15),球囊损伤组(n=15),ADMSC移植组(n=15).对照组仅予颈部切开缝合,球囊损伤组进行左侧颈总动脉球囊损伤,ADMSC组在血管损伤同时予以ADMSC移植治疗.在术后的第1、2、4周时处死大鼠,随机取第2、3、5、7天观察左侧颈总动脉,观察绿荧光蛋白标记的ADMSC在颈总动脉的定植情况;苏木精-伊红染色观察颈总动脉内膜增生;酶联免疫吸附试验法测定
【机 构】
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福建医科大学附属第一医院急诊科,福建福州350005;福建医科大学附属第一医院福建省高血压研究所,福建福州350005;福建医科大学附属第一医院急诊科,福建福州350005;福建医科大学附属第一医院福
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目的 探讨移植脂肪干细胞(ADMSC)对球囊损伤后大鼠颈动脉新生内膜异常增殖的影响及机制.方法 45只雄性SD大鼠,随机分为3组:对照组(假手术,n=15),球囊损伤组(n=15),ADMSC移植组(n=15).对照组仅予颈部切开缝合,球囊损伤组进行左侧颈总动脉球囊损伤,ADMSC组在血管损伤同时予以ADMSC移植治疗.在术后的第1、2、4周时处死大鼠,随机取第2、3、5、7天观察左侧颈总动脉,观察绿荧光蛋白标记的ADMSC在颈总动脉的定植情况;苏木精-伊红染色观察颈总动脉内膜增生;酶联免疫吸附试验法测定血清中一氧化氮的水平,逆转录聚合酶链反应检测颈总动脉内皮型一氧化氮合酶(eNOS) mRNA的表达;免疫印迹法测定颈总动脉细胞周期素依赖性激酶抑制蛋白p27kip1蛋白、p21Cip1蛋白以及增殖细胞核抗原(PCNA)蛋白的水平.结果 球囊损伤4周后,SD大鼠颈总动脉内膜增生明显,血管壁腔比值(W/L)高于对照组(1.24±0.08比0.38±0.09,t=13.84,P＜0.01);ADMSC移植后可定植于血管内膜,且显著抑制球囊损伤后新生内膜的异常增殖,血管W/L低于损伤组(0.63±0.05比1.24±0.08,t=-9.75,P＜0.01).球囊损伤后,与对照组比较,颈总动脉p27kip1、p21Cip1蛋白的表达水平呈时间依赖性增加,于术后4周达高峰;而球囊损伤后PCNA的表达水平在1周后达高峰,2周后降至正常.移植ADMSC增加了球囊损伤4周时颈总动脉p21 Cip1蛋白及p27kip1蛋白的表达;同时降低了损伤后1周PCNA的表达.球囊损伤后4周,损伤血管eNOS mRNA表达及血清一氧化氮水平[(56.37±9.91)比(112.27±9.05)μmol/L,t=-7.66,P＜0.05]降低;ADMSC移植后,损伤血管eNOS mRNA表达及血清一氧化氮水平[(75.83±3.67)比(56.37±9.91)μmol/L,t=2.96,P＜0.05]增加.结论 移植的ADMSC可以定植于损伤血管,抑制球囊损伤后颈动脉新生内膜的异常增殖,机制可能与上调p21Cip1,p27kip1,减少PCNA的表达,同时增加损伤血管eNOS mRNA的表达,提高血清中一氧化氮的水平有关.
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