【摘 要】
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用纯化的重组蛋白His-gCN813制备抗PRV-gC抗体,并分析伪狂犬病病毒(pseudorabies virus,PRV)gC蛋白在真核细胞的表达情况.木研究以提取的病毒基因组为模板,PCR克隆PRV gC全长
【机 构】
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中国农业科学院上海兽医研究所兽医公共卫生实验室,青岛农业大学动物科技学院
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用纯化的重组蛋白His-gCN813制备抗PRV-gC抗体,并分析伪狂犬病病毒(pseudorabies virus,PRV)gC蛋白在真核细胞的表达情况.木研究以提取的病毒基因组为模板,PCR克隆PRV gC全长基因,构建gC真核表达质粒p3xFLAGgC,在真核细胞中表达gC基因;纯化蛋白His-gCN813制备的抗体,Western blotting和间接免疫荧光(IFA)检测到p3 xFLAG-gC转染真核细胞和PRV感染细胞中的gC蛋白.结果表明本试验成功构建了 PRV gC基因真核表达系统,获得了特异性抗PRV gC抗体,重组gC真核表达质粒p3 xFLAGgC转染Vero细胞,表达的重组蛋白gC为72 ku,PRV感染Vero细胞,表达的gC蛋白为55,72和94 ku,主要定位在细胞浆,gC蛋白可以作为PR V感染的指示分子,为下一步研究PRV和宿主相互作用及PRV的复制奠定了基础.
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