【摘 要】
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目的:探讨钙激活性氯离子通道2(calcium-activated chloride channel 2,CLCA2)在大鼠低氧性肺动脉平滑肌细胞(pulmonary artery smooth muscle cells,PASMCs)中mRNA和蛋白表达的变化及其与ERK1/2信号通路的关系.方法:取14只雄性SD大鼠,使用酶消化法进行PASMCs 原代培养,应用小鼠抗大鼠SM α-actin
【机 构】
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温州医科大学病理生理学教研室,浙江温州325035
【出 处】
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中国病理生理学会第十届全国代表大会
论文部分内容阅读
目的:探讨钙激活性氯离子通道2(calcium-activated chloride channel 2,CLCA2)在大鼠低氧性肺动脉平滑肌细胞(pulmonary artery smooth muscle cells,PASMCs)中mRNA和蛋白表达的变化及其与ERK1/2信号通路的关系.方法:取14只雄性SD大鼠,使用酶消化法进行PASMCs 原代培养,应用小鼠抗大鼠SM α-actin 免疫荧光细胞化学法进行细胞鉴定;经培养鉴定PASMCs 随机分为常氧组(N组,n =6)、低氧组(H组,n =6)、DMSO对照组(D组,n =6)、U0126干预组(U组,n =6)和staurosporine aglycone干预组(SA组,n =6);采用免疫印迹法检测CLCA2蛋白的表达,选用RT-PCR 技术测定CLCA2 mRNA 水平的表达.结果:与N组比较,H组PASMCs 中CLCA2 mRNA和蛋白的表达量均显著上调(均P<0.01);与D组比较,U组CLCA2 mRNA和蛋白的表达均明显上调(均P<0.01),SA组mRNA的表达显著下调(P<0.01),蛋白的表达轻微下调(但P >0.05).结论:低氧可上调大鼠PASMCs 中CLCA2 mRNA和蛋白的表达;ERK1/2 通路抑制剂U0126 能上调PASMCs 中CLCA2 mRNA和蛋白的表达;ERK1/2 通路激活剂staurosporine aglycone 可下调PASMCs 中CLCA2 mRNA和蛋白的表达.
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