【摘 要】
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建立了大肠杆菌的高效超声波转化方法,为利用大肠杆菌重组表达功能基因提供基础。采用超声波诱导的方法将外源DNA转化进大肠杆菌基因组中,并对大肠杆菌生长状态、超声波作用
【机 构】
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浙江省质量检测科学研究院,浙江工业大学药学院
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建立了大肠杆菌的高效超声波转化方法,为利用大肠杆菌重组表达功能基因提供基础。采用超声波诱导的方法将外源DNA转化进大肠杆菌基因组中,并对大肠杆菌生长状态、超声波作用条件等影响因素进行探索。当采用OD600为0.6的菌体制备感受态细胞、超声波强度为400 W、作用时间为35 min、质粒DNA质量浓度为0.2 g/L时,转化效率达到最大值,为1.3×10^3CFU/μg DNA。经抽样PCR（聚合酶链式反应）鉴定,所得到的转化子均为阳性克隆。通过对超声波转化条件的优化,获得了高效转化方法。
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