禽流感病毒双抗体夹心ELISA检测方法的建立

• 作 者: 李娜 张保平 秦爱建
• 机 构: 湖南文理学院生命科学学院,常德职业技术学院生物工程系,扬州大学兽医学院江苏省动物预防医学重点实验室
• 出 处: 安徽农业科学
• 发表日期: 2011年28期
• 关键词: 禽流感病毒 单克隆抗体 双抗体夹心ELISA Avian influenza viruses Monoclonal antibody Double-anti
• 基金项目: 湖南文理学院硕士启动科研项目（JJQD06022）,2010年度湖南省高校创新平台开放基金项目（10K043）,湖南省重点建设学科（动物学）资助,湖南省高校产学研究合作示范基地--水生生物资源与利用项目资助,水生生物资源保育与利用省高校科技创新团队资助

采用饱和硫酸铵初步纯化的兔抗AIV-H9高免血清中的IgG作为包被抗体,利用抗AIV-NP-7B4单抗作为ELISA的第二抗体,建立了检测禽流感病毒（AIV）抗原的双抗体夹心ELISA方法。经方阵滴定试验测定反应的最佳工作条件：兔抗AIV-H9高免血清IgG包被稀释度为1：8000（浓度为3.531μg/ml）,抗AIV-NP-7B4单抗腹水最佳使用稀释度为1：800,酶标二抗的工作浓度为1：4000。与其他禽易感病毒（NDV、IBV、EDS-76V）等均没有交叉反应。结果表明,该方法具有快速、敏感、特异